Дисбактериоз кишечника с фагочувствительностью
Необходимые анализы для диагностики дисбактериоза кишечника включают целый ряд исследований. В качестве биологического материала используют, как правило, фекалии. Исследование, направленное на определение чувствительности к различным бактериофагам, успешно дополняет другие анализы и помогает лечащему доктору определиться с диагнозом, чтобы назначить адекватное и правильное лечение.
Что такое бактериофаги?
Речь идет о внутриклеточной форме жизни. Иначе говоря, бактериофагами называют паразитирующие в клетке вирусы. Но исходя из названия становится понятно, что живут они в бактериях. Представляют собой ни что иное, как белковую молекулу, которая защищает спираль ДНК или РНК.
Бактериофаг размножается, используя ДНК или РНК бактериальной клетки, постепенно разрушая ее. Последняя гибнет, а частицы вируса захватывают жизненное пространство. Бактериофаги обладают специфичностью к определенным бактериям. Это нашло применение как в диагностике, так и лечении бактериальных инфекций.
Анализ на чувствительность к бактериофагам является важным методом в диагностике кишечных расстройств. Именно поэтому при подозрении на дисбактериоз этот метод очень актуален.
Когда назначается исследование и для чего используется?
Данный анализ входит в спектр исследований, необходимых для диагностики синдрома избыточного бактериального роста или дисбиоза. Гастроэнтерологи рекомендуют не ограничиваться посевом кала на дисбактериоз. Исследование позволяет определить качественный состав флоры кишечника. Можно даже обнаружить их количество при наличии современных тест-систем.
Самое важное, для чего и выполняется этот анализ, связано с возможным лечением.
Бактериофаготерапия может стать дополнением к уже назначенным антибактериальным средствам, либо альтернативным методом лечения при непереносимости или неэффективности последних. А для выбора бактериофага необходимо убедиться, что к нему чувствительна патогенная флора, на которую решено воздействовать.
Именно для этого проводится описываемый анализ. Еще одно важное применение для исследования на чувствительность к бактериофагам сводится к контролю над проводимым лечением. Анализ на чувствительность к бактериофагам используется не только в целях диагностики кишечного дисбиоза.
Обследование проводится в следующих областях медицины:
| Раздел медицины | Практическое применение |
| Общая хирургия | Лечение остеомиелита, ожогов, рожистого воспаления. |
| Урология | Диагностика циститов, цистопиелонефритов. |
| Оториноларингология | Диагностика тонзиллитов, отитов, синуситов, их лечение при затяжном течении и неэффективности антибиотиков. |
| Гинекология | Идентификация возбудителей при воспалительных заболеваниях женских половых органов. |
| Дерматология | Лечение карбункулов, фурункулов, флегмонозного воспаления. |
Причины возникновения дисбактериоза
Каждый орган, каждая часть тела человека представляет собой некий биоценоз. Иными словами, это совокупность существующих там бактерий. В желудочно-кишечном тракте обитают одни микроорганизмы, в то же время мочеполовую системы заселяют другие, а на коже обнаруживают третьи.
При некоторых ситуациях их количество и соотношение меняется. Иногда это становится причиной заселения патологическими бактериями. Эта ситуация и составляет суть дисбактериоза.
Причинных и предрасполагающих факторов развития этого патологического состояния существует много. В первую очередь, исключаются органические причины. Например, после операций. Очень часто баланс микрофлоры нарушается после удаления кишки по причине опухоли или кишечной непроходимости.
Среди операций, которые могут привести к дисбиозу, рассматривают ваготомию (для лечения язвы желудка), резекцию части желудка или двенадцатиперстной кишки. Формирование послеоперационных свищей предрасполагает к развитию дисбиоза кишечника.
Анализ на чувствительность к бактериофагам применяется для выявления дисбактериоза.
Следующая группа заболеваний связана с хроническим воспалением слизистой оболочки. Где бы ни был локализован этот патологический процесс, его обязательно будет сопровождать нарушение нормального соотношения полезных и условно-патогенных бактерий. Сюда относят илеиты, еюниты, дуодениты, колиты, а также циститы, уретриты, кольпиты, вагиниты, простатиты.
Нарушения моторной функции вызывают застой кишечного содержимого и тем самым создают благоприятные условия для заселения патогенной и условно-патогенной флоры. Для последних условия становятся настолько благоприятными, что они реализуют свои патогенные свойства и вызывают проявления дисбактериоза.
Эта ситуация возможна при сахарном диабете, когда формируется гастростаз в результате формирования автономной диабетической нейропатии как осложнения.
Ухудшение всасывания в результате нарушения функции поджелудочной железы или глистной инвазии отражается на работе кишечника в целом. Поэтому это следующий фактор риска развития дисбактериоза.
Дисбактериоз следует подозревать и исследовать при длительном употреблении антибиотиков. Это же касается пациентов, которые находятся на химотерапии по поводу онкологических заболеваний. Сюда относят и цитостатики, назначаемые при системных заболеваниях, ревматоидном артрите, гломерулонефритах.
Дисбиоз наблюдается при выраженном снижении иммунитета. Поэтому его исключают при ВИЧ-инфекции. У детей с первичным иммунодефицитом тоже необходимо исследовать кал на дисбактериоз.
Как правильно подготовиться к анализу
Любое обследование, в котором в качестве биологического материала выступает кал, требует подготовки. Она позволит предотвратить искажение результатов и появление ложноположительных или ложно-отрицательных интерпретаций.
В первую очередь, акцент ставится на диете. Исключаются мясные продукты. Лучше, если продукты из рыбы также не будут использоваться в пищу хотя бы за 3 дня до планируемого обследования. Не следует употреблять блюда из свеклы, которые красят биологический материал. Алкогольсодержащие напитки также рекомендовано исключить из рациона.
На лекарственные средства также лучше обратить внимание. Особенно это касается антибактериальных препаратов. Они убивают микрофлору, тем самым искажая результаты исследования.
Акт дефекации должен быть максимально естественным и произвольным. Следует стараться избегать приема слабительных препаратов. Перед актом опорожнения кишечника необходимо провести тщательную гигиену области промежности. Для этого промывают анус и перианальную область промыть теплой мыльной водой.
Анализ кала на дисбактериоз с определением чувствительности
Исследование применяется для диагностики дисбиотических нарушений. Назначает его доктор (терапевт, врач общей практики, педиатр или гастроэнтеролог). Анализ кала на дисбактериоз представляет собой посев кала на специальные питательные среды, в том числе, на чувствительность к бактериофагам.
При наличии в кишечном содержимом того или иного микроорганизма на чашках Петри в лаборатории вырастет целая колония бактерий. По их росту, интенсивности и количеству бактерий определяется дисбиоз и его степени тяжести.
Подготовка тары
В качестве посуды можно использовать маленькие стеклянные баночки из-под консервов, аджики, майонезе, джема. Но важно правильно обработать их. Лучше, если предварительно их промыть с любым моющим средством, а затем, смыв антисептик, прокипятить банку. Крышка подвергается такой же обработке.
В настоящее время большинство лабораторий предъявляет обязательные требования к таре для сдачи кала. Это должны быть одноразовые контейнеры. Их приобретение значительно упрощает задачу.
Сбор материала
Для того, чтобы не пытаться опорожнить кишечник в маленькую тару, лучше воспользоваться пищевой пленкой. Ее следует натянуть над унитазом. Затем после дефекации ложечкой, которая прикреплена к внутренней поверхности крышечки контейнера, нужно положить в него не более 10 г кала.
Сроки и условия хранения кала
Самый лучший вариант, при котором возможно максимально четко и полно сохранить весь микробиологический состав фекалий, это доставка анализа к лаборатории в течение 3 ч. Но это не всегда возможно, так как позывы к дефекации — не всегда контролируемый процесс. Особенно много проблем у пожилых пациентов, склонных к запорам.
Рекомендуется хранение биологического материала в условиях холодильника. Это ни в коем случае не должна быть морозильная камера.
Как правило, температурный оптимум для хранения фекалий составляет от 4 до 9 градусов. Поэтому такие условия можно найти лишь на средней полке. Боковые полочки также не подходят. В условиях комнатной температуры кал должен находиться максимум 15-20 мин. А в холодильнике при оптимальных температурных условиях до 8 ч.
Определение чувствительности к фагам
Анализ на чувствительность к бактериофагам важен как в диагностическом, так и в лечебном плане. Обычно он выполняется после микробиологического исследования или посева кала на флору. После того, как выделена чистая патогенная культура, проводится исследование на чувствительность ее к существующим в арсенале бактериофагам.
Как определяют чувствительность к фагам
Используется также микробиологический метод. По тому, насколько быстро и полно наступил лизис бактерий в выросшей колонии, оценивается чувствительность к бактериофагу. Буквой S отображается, что микробы чувствительны к вирусным частицам, а буква R говорит о наличии резистентности.
Для максимально информативного результата обследования необходимо использовать специальные твердые и полужидкие среды. В качестве бактериофагов применяют один моновалентный фаг, который направлен на конкретную выделенную ранее колонию бактерий.
Второй и третий фаг нужны для контроля. По своим свойствам они поливалентные, то есть неспецифические, и действуют на все виды бактериальных клеток.
Расшифровка результатов
Анализ на чувствительность к бактериофагам должен быть правильно интерпретирован. Для этого обращаются к терапевту или гастроэнтерологу. Иногда может понадобиться помощь инфекциониста.
Выделяют нормальные, условно-патогенные и патогенные бактерии. Нужно стремиться не допускать снижения количества первых, а также повышения на этом фоне количества бактерий 2-й и 3-й групп.
Нормальные бактерии
Это, в первую очередь, представители бифидобактерий. Их норма у детей — 10 000 000 000 — 100 000 000 000 КОЕ/г. Для взрослых их число несколько меньше — от 1 000 000 000 до 10 000 000 000 КОЕ/г. Заметное снижение количества этих полезных для кишечника бактерий приводит к дисбактериозу.
Вторая важная группа — лактобактерии. Для взрослых норма составляет 10 000 000 — 100 000 000 КОЕ/г. При заболеваниях кишечника и других состояниях их количество падает. Тогда реализуются все условия, чтобы выросло количество условно-патогенных микроорганизмов, и они реализовали свои патогенные свойства.
Условно-патогенные бактерии
Важно оценить не только количество выделенных микроорганизмов, но и состояние нормальной флоры. Если с ней есть проблемы (дефицит бифидо- и лактобактерий), следует говорить о дисбактериозе. Особенно это касается ситуаций, когда есть клинические признаки синдрома избыточного роста бактерий в кишечнике.
К условно-патогенным микроорганизмам относят:
- Клебсиеллу;
- Цитробактер;
- Протей;
- Энтеробактер;
- Хафнию.
Бактериофаги отлично дополнят анализ (посев) на микрофлору при подозрении на дисбактериоз.
Патогенные бактерии
В случае обнаружения даже минимального количества колоний представителей этой группы бактерий, следует активно лечить дисбактериоз. К ним относят Стафилококк, а также дрожжеподобные Кандиды, а также Энтерококки.
Важно определять их количество для дальнейшего мониторинга эффективности лечения. Бактериофаги необходимы для определения чувствительности к ним. Ведь при неэффективности к антибиотикам именно к фаготерапии придется обратиться к врачу.
Несмотря на то, что невозможно полностью предотвратить передачу патогенов, для минимизации вероятности инфекционных заболеваний, нужно поддерживать правильную гигиену.
Медицинский анализ, направленный на определение чувствительности или резистентности к определенным бактериофагам, служит хорошим подспорьем при наличии подозрений на дисбактериоз. Это очень перспективно в диагностическом плане, а также создает перспективу для развития отрасли фаготерапии как альтернативы антибиотикам.
Видео о бактериофагах
Фильм о бактериофагах:
Источник
[10-065]
Дисбактериоз кишечника
1500 руб.
Микробиологическое исследование, которое позволяет оценить состав микрофлоры кишечника – концентрацию и соотношение “полезных”, условно-патогенных и патогенных микроорганизмов в кале, определить специфическую активность основных пробиотиков в отношении выявленных микроорганизмов и их чувствительность к бактериофагам и антибиотикам. К нормальной микрофлоре кишечника (“полезные” бактерии) относятся лактобактерии, бифидобактерии, энтерококки, кишечные палочки (типичные), анаэробная флора (бактероиды). Условно-патогенная флора – это энтеробактерии, неферментирующие бактерии, стафилококки, анаэробные бактерии (клостридии), грибы. Патогенными микроорганизмами являются сальмонеллы, шигеллы, патогенные эшерихии. При выявлении патогенных и/или условно-патогенных микроорганизмов будет определена их чувствительность к антимикробным препаратам (антибиотикам и бактериофагам) и пробиотикам. При обнаружении микроорганизмов, составляющих нормальную микрофлору, чувствительность к антибиотикам и бактериофагам не определяется, т.к. не имеет диагностического значения.
Синонимы русские
Дисбиоз кишечника, определение пробиотиков-антагонистов.
Синонимы английские
Intestinal dysbiosis, antagonistic activity of probiotics and bacteriophage sensitivity test, Intestinal dysbacteriosis.
Метод исследования
Микробиологический метод.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Кал.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Исследование рекомендуется проводить до начала приема антибиотиков и других антибактериальных химиотерапевтических препаратов.
- Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить (по согласованию с врачом) прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонна, пилокарпин и др.), и препаратов, влияющих на окраску кала (железо, висмут, сернокислый барий), в течение 72 часов до сбора кала.
Общая информация об исследовании
Дисбактериоз (дисбиоз) кишечника – это нарушение состава и количественного соотношения бактериальных и грибковых микроорганизмов желудочно-кишечного тракта. В норме слизистая оболочка ЖКТ является средой обитания так называемых комменсальных микроорганизмов, обеспечивающих целый ряд защитных функций в обмен на микронутриенты, используемые человеком. Большинство кишечных комменсалов относятся к родам Lactobacillus, Bifidobacterium и Bacteroides (облигатные бактерии), хотя состав и количество микроорганизмов сильно варьируются в зависимости от отдела ЖКТ. Так, желудок характеризуется наименьшей плотностью бактерий, среди которых преобладают Lactobacillus, Streptococcus и Helicobacter pylori. В тонкой кишке обнаруживается до 103-106 КОЕ/мл бактерий, преимущественно Streptococcus и Lactobacillus. Наибольшая плотность комменсальных микроорганизмов наблюдается в толстой кишке (108-109 КОЕ/мл), где преобладают Bacteroides, Clostridium, Fusobacterium и Bifidobacterium. Комменсальные микроорганизмы находятся в динамическом взаимодействии с кишечным эпителием и, таким образом, являются механическим препятствием для инвазии патогенов. Кроме того, они секретируют ряд противомикробных соединений (например, дефензины). Бактерии-комменсалы способны регулировать иммунный ответ слизистых оболочек кишечника и в некоторых случаях подавлять воспалительные, в том числе аллергические, реакции. Нарушение баланса микробиоты возникает в результате длительного или бесконтрольного лечения антибактериальными препаратами, при нарушении моторики ЖКТ (послеоперационный период, прием слабительных препаратов), мальабсорбции (хронический алкоголизм, хронический панкреатит) и при некоторых других состояниях. Дисбактериоз может приводить к развитию заболеваний ЖКТ и других органов. Так, в настоящее время получены данные о его роли в патогенезе болезни Крона, неспецифического язвенного колита и целиакии, а также синдрома хронической усталости и атопического дерматита.
Основным способом диагностики дисбактериоза является микробиологический метод, при котором производят качественную и количественную оценку облигатных, условно-патогенных и патогенных микроорганизмов в кале. На основании результатов исследования делают вывод о дефиците облигатных микроорганизмов или об избыточном росте условно-патогенных или патогенных бактерий. Микробиологическое исследование – это один из наиболее специфических и чувствительных методов исследования, применяемых при диагностике дисбактериоза. Следует, однако, помнить, что бактериологический состав кала (он используется в качестве биоматериала) несколько отличается от бактериологического состава слизистой оболочки кишки. Кроме того, результат теста может зависеть от многих других факторов, таких как недавнее употребление антибактериальных препаратов, продуктов, богатых пробиотиками, или слабительных средств.
С учетом растущей устойчивости условно-патогенных и патогенных микроорганизмов к антибактериальным препаратам все большую роль в терапии дисбактериоза играют альтернативные методы лечения с помощью пробиотиков. Пробиотики – это группа препаратов, содержащих бактерии-комменсалы, или дрожжевые грибы. Считается, что они защищают организм от избыточной условно-патогенной и патогенной микробиоты. Совокупность защитных свойств пробиотиков в отношении какого-либо микроорганизма называется антагонистической активностью и может быть определена с помощью микробиологического исследования. В ходе анализа оценивается антагонистическая активность основных используемых в гастроэнтерологической практике пробиотиков. Определение антагонистической активности пробиотиков проводят перед назначением указанных препаратов для лечения дисбактериоза. Оно может быть дополнено анализом на чувствительность выявленных микроорганизмов к антибиотикам и бактериофагам.
Результат анализа оценивают с учетом дополнительным лабораторных и инструментальных данных.
Для чего используется исследование?
- Для диагностики и лечения дисбактериоза кишечника, контроля его лечения;
- чтобы установить причины кишечных расстройств;
- для подбора рациональной терапии антибиотиками.
Когда назначается исследование?
- При обследовании пациента после длительного курса лечения антибактериальными препаратами;
- при обследовании пациента с указанием на бесконтрольный прием антибактериальных препаратов и слабительных средств в анамнезе;
- при выявлении устойчивости условно-патогенных и патогенных микроорганизмов к антибактериальным препаратам;
- при обследовании пациента с хроническим панкреатитом, хроническим алкоголизмом и другими состояниями, сопровождающимися мальабсорбцией;
- при хронической диарее;
- после долгого лечения антибиотиками, глюкокортикостероидами, иммунодепрессантами, химиотерапевтическими препаратами;
- при аллергических заболеваниях, которые плохо поддаются лечению (например, атопическом дерматите);
- после воздействия химических веществ или ионизирующей радиации – если есть симптомы дисфункции кишечника;
- при длительном периоде выздоровления после острых кишечных инфекций.
Что означают результаты?
Виды микроорганизмов | Возраст, годы | ||
Меньше 1 | 1-60 | Старше 60 | |
Бактероиды | 107– 108 | 109- 1010 | 1010- 1011 |
О дисбактериозе кишечника свидетельствует:
- увеличение количества одного или нескольких видов условно-патогенных микроорганизмов при нормальном количестве бифидобактерий в кишечнике,
- увеличение одного или нескольких видов условно-патогенных микроорганизмов при умеренном снижении количества бифидобактерий (на 1-2 порядка – до 107-108 КОЕ/г),
- снижение содержания представителей облигатной микрофлоры (бифидобактерий и/или лактобацилл) без увеличения количества сапрофитной или условно-патогенной микрофлоры кишечника,
- умеренное или значительное (7 КОЕ/г) снижение количества бифидобактерий в сочетании с выраженным уменьшением количества лактобацилл, появлением изменённых форм кишечной палочки, выявлением одного или нескольких представителей условно-патогенных микроорганизмов в высоких титрах (до 107-108 КОЕ/г).
Что может влиять на результат?
- Антибактериальная терапия или терапия пробиотиками.
Также рекомендуется
- Копрограмма
Кто назначает исследование?
Врач общей практики, гастроэнтеролог, педиатр, инфекционист.
Литература
- Chan BK, Abedon ST, Loc-Carrillo C. Phage cocktails and the future of phage therapy. Future Microbiol. 2013 Jun;8(6):769-83.
- Hütt P, Shchepetova J, Lõivukene K, Kullisaar T, Mikelsaar M. Antagonistic activity of probiotic lactobacilli and bifidobacteria against entero- and uropathogens. J Appl Microbiol. 2006 Jun;100(6):1324-32.
- Robles Alonso V, Guarner F. Linking the gut microbiota to human health. Br J Nutr. 2013 Jan;109 Suppl 2:S21-6. Review.
- Hardy H, Harris J, Lyon E, Beal J, Foey AD. Probiotics, prebiotics and immunomodulation of gut mucosal defences: homeostasis and immunopathology. Nutrients. 2013 May 29;5(6):1869-912.
Источник