Кишечная группа микроорганизмов их свойства
Оглавление темы “Санитарно-микробиологическое исследование почвы. Микрофлора водоемов.”: Индикаторы загрязнения. Бактерии группы кишечной палочки.Между группами санитарно-показательных микроорганизмов нет чётко очерченных границ. Некоторые микроорганизмы являются показателями как фекального, так и орального загрязнения. Некоторые — показателями процессов самоочищения. В связи с этим все СПМ расценивают как индикаторы биологического загрязнения. • Группа А санитарно-показательных микроорганизмов. Включает обитателей кишечника человека и животных. Микроорганизмы расценивают как индикаторы фекального загрязнения. В нее входят БГКП — эшерихии, энтерококки, протеи, сальмонеллы. Также в группу А включены сульфитвосстанавливающие клостридии (Clostridium petfringens и др.), термофилы, бактериофаги, бактероиды, синегнойная палочка, кандиды, акинетобактеры и аэромонады. • Группа В санитарно-показательных микроорганизмов. Включает обитателей верхних дыхательных путей и носоглотки. Микроорганизмы расценивают как индикаторы орального загрязнения. В неё входят зеленящие, а- и (3-стрептококки, стафилококки (плазмокоагулирующие, лицитиназа-положительные, гемолитические и антибиотикоустойчивые; в некоторых случаях также определяют вид золотистого стафилококка). • Группа С санитарно-показательных микроорганизмов. Включает сапрофитические микроорганизмы, обитающие во внешней среде. Микроорганизмы расценивают как индикаторы процессов самоочищения. В неё входят бактерии-протеолиты, бактерии-аммонификаторы и бактерии-нитрификаторы, некоторые спорообразующие бактерии, грибы, актиномицеты, целлюлозобактерии, бделловибрионы и сине-зелёные водоросли.
Основные группы санитарно-показательных микроорганизмовК основным санитарно-показательным микроорганизмам относят БГКП, энтерококки, протеи, сальмонеллы, Clostridium perfringens, термофильные бактерии и бактериофаги энтеробактерий (колифаги). Бактерии группы кишечной палочкиКишечная палочка положила начало всей группе СПМ. В состав БГКП включены различные представители семейства Enterobacteriaceae. В зависимости от цели и объекта исследования к санитарно-показательным БГКП предъявляют различные требования. Их условно разделяют на три подгруппы и при различных обстоятельствах используют факт их наличия для бактериологической характеристики объекта или субстрата. Подгруппа I кишечной палочки включает БГКП, которые пытаются выявить, но которых не должно быть при исследовании объектов и субстратов, «чистых» по своей природе или ставших чистыми в результате их обработки (например, термической). В группу объектов, обладающих такими свойствами, входят следующие. Питьевая (артезианская, водопроводная хлорированная, колодезная) и дистиллированная вода (взятая из дистиллятора или трубопровода). Термически обработанные пищевые продукты (котлеты, колбасы, рыба и т.д.). Анализируют пробы, отобранные из толщи продукта. Молоко (взятое из пастеризатора до поступления в молокопроводы), супы, соусы, компоты, вторые блюда (отобранные из котлов). Смывы, отобранные при проведении контроля эффективности дезинфекционной обработки в положенные сроки (не ранее 45 мин и не позднее 1 ч после обработки). Бактерии этой подгруппы кишечной палочки ферментируют лактозу и глюкозу или только глюкозу до газа при 37 °С и не проявляют оксидазную активность. В эту подгруппу входят Escherichia га//, клебси-еллы, цитробактеры, энтеробактеры и другие представители семейства Enterobacteriaceae. Их наличие допускается в объектах, не относящихся к разряду «чистых». Подгруппа II кишечной палочки включает БГКП, указывающие на неопределённое по времени фекальное загрязнение. Микроорганизмы сбраживают лактозу и глюкозу до кислоты и газа при 43-44,5 °С. В эту подгруппу входят бактерии (Е. coli, клебсиеллы, цитробактеры, энтеробактеры и др.), сохранившие способность к газообразованию при повышенном температурном режиме. Подобные требования предъявляют к БГКП при невозможности уберечь субстрат от загрязнения. При этом следует ограничиться определением лишь показателей эпидемиологического неблагополучия. К таким объектам относят: воду открытых водоёмов, сточные воды, почву и все пищевые продукты, для которых высок риск обсеменения после термической обработки. В подобных случаях исследуют твёрдые пищевые продукты (поверхностный слой), жидкие пищевые продукты, вторые и третьи блюда на раздаче, смывы с оборудования и посуды. Посевы культивируют при 43-44,5 °С. Е. coli дифференцируют от других бактерий по способности ферментировать лактозу и глюкозу или только глюкозу. Подгруппа III кишечной палочки включает БГКП, указывающие на свежее фекальное загрязнение. Отличительная особенность бактерий этой группы — способность расщеплять лактозу до газа при 43-44,5 “С. – Также рекомендуем “Бактерии рода Enterococcus. Бактерии рода Proteus.” |
Источник
В группу БГКП входят представители нескольких родов семейства Enterobacteriaceae, в том числе Escherichia, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, Serratia. Эти микроорганизмы обладают многими общими морфологическими, культуральными и биохимическими свойствами.
Бактерии группы кишечных палочек – короткие (длина 1-3 мкм, ширина 0,5-0,8 мкм) полиморфные подвижные и неподвижные грамотрицательные палочки, не образующие спор. Бактерии этой группы хорошо растут на простых питательных средах: мясопептонном бульоне (МПБ), мясопептонном агаре (МПА). На МПБ дают обильный рост при значительном помутнении среды; осадок небольшой, сероватого цвета, легкоразбивающийся. Образуют пристеночное кольцо, пленка на поверхности бульона обычно отсутствует. На МПА колонии прозрачные с серовато-голубым отливом, легко сливающиеся между собой. На среде Эндо образуют плоские красные колонии средней величины. Красные колонии могут быть с темным металлическим блеском (Е. coli) или без блеска (Е. aerogenes). Для лактозоотрицательных вариантов кишечной палочки (В. paracoli) характерны бесцветные колонии. Им свойственна широкая приспособительная изменчивость, в результате которой возникают разнообразные варианты, что усложняет их классификацию.
Большинство бактерий группы кишечных палочек (БГКП) не разжижают желатина, свертывают молоко, расщепляют пептоны с образованием аминов, аммиака, сероводорода, обладают высокой ферментативной активностью в отношении лактозы, глюкозы и других Сахаров, а также спиртов. Не обладают оксидазной активностью. По способности расщеплять лактозу при температуре 37°С БГКП делят на лактозоотрицательные и лактозоположительные кишечные палочки (ЛКП), или колиформные, которые нормируются по международным стандартам. Из группы ЛКП выделяются фекальные кишечные палочки (ФКП), способные ферментировать лактозу при температуре 44,5°С. К ним относится Е. coli, не растущая на цитратной среде.
В соответствии с ГОСТ 32901-2014 «Молоко и молочная продукция. Методы микробиологического анализа» бактерии группы кишечных палочек (БГКП, коли-формы) – это микроорганизмы семейства энтеробактерий родов эшерихия, цитробактер, энтеробактер, клебсиела, серратия; бесспоровые, грамотрицательные, аэробные и факультативно-анаэробные палочки, сбраживающие лактозу с образованием кислоты и газа.
На этих свойствах основано определение БГКП в молочных продуктах в средах Кесслер (в соответствии с 32901-2014 по образованию газа) или Кода (по изменению цвета индикатора) после термостатирования при температуре 37±1°С в течение 24 ч, а для мороженого – 48 ч. Дифференциально- диагностическая – среда Эндо, на которой Е. coli образует красные колонии с металлическим блеском. Образование полупрозрачных бесцветных или бледно-розовых колоний говорит о принадлежности микроорганизмов к лакгозоотри- цательным, в том числе патогенным энтеробактериям.
Санитарно-показательное значение родов неодинаково: наличие эшери хий свидетельствуют о свежем фекальном загрязнении, цитробактер и энтеробактер (иногда их считают измененными эшерихиями под влиянием пребывания во внешней среде) – показатели давнего или нефекального загрязнения.
В молоке БГКП хорошо размножаются, доводя его кислотность до 50- 80°Т и образуя в нем неровный ноздреватый сгусток. Молочнокислые микроорганизмы замедляют развитие БГКП. При режимах пастеризации, принятых в молочной промышленности, БГКП гибнут. Обычные дезинфицирующие средства полностью обеззараживают оборудование, инвентарь, руки от БГКП.
Дифференциацию БГКП можно проводить с помощью специальных тестов (комплекс признаков ТИМАЦ + Л):
Т – температурный тест (тест Эйкмана, выявляет способность эшери- хий ферментировать глюкозу, лактозу, маннит с образованием газа при 44- 45°С, другие не обладают такой способностью);
И– индолообразование (способность эшерихий расщеплять аминокислоту триптофан с выделением индола);
М – реакция с метиловым красным, заключается в определении кислотообразования при ферментации глюкозы: если индикатор изменяет светло-желтый цвет на красный, это свидетельствует о снижении рН до 5 и о наличии эшерихий и цитробактер, энтеробактер не изменяет цвет индикатора;
А– реакция на ацетилметилкарбинол (ацетоин), выявляет способность микроорганизмов образовывать это вещество в среде с глюкозой; проводится качественная реакция с гидроксидом калия и креатином, дающая розовый цвет, такой способностью обладают только представители рода цитробактер;
Ц – цитратный тест (способность микроорганизмов усваивать в качестве единственного источника углерода лимонную кислоту или ее соли, используют среду Козера с цитратами, цитробактер и энтеробактер растут на таких средах, называются цитратположительными бактериями, эшерихии – нет);
Л – лактозный тест (способность ферментировать лактозу).
Основные (наиболее стабильные) тесты – температурный и цитратный.
При воздействии факторов внешней среды (например, в присутствии антибиотиков) свойства БГКП могут меняться. Для дифференциации видов дополнительно определяют уреазную активность, рост на средах с цианистым калием, ферментацию различных углеводов, используют специальные таблицы.
Критерии санитарной оценки молочных продуктов и других объектов по присутствию СПМ предусмотрены действующими ГОСТ и СанПиН. Использовавшийся ранее показатель бродильного титра заменен показателем отсутствия БГКП в определенной массе продукта. Так, например, в пастеризованном молоке БГКП должны отсутствовать в 0,01 см, в ультрапастеризованном молоке – в 10 см3, ряженке – в 1 г, в кефирной закваске – в 3 мл, в твороге – в 0,001 г.
Источник
Семейство кишечных
бактерий (семейство Enterobacteriaceae)
состоит из множества условно-патогенных
и патогенных для человека грамотрицательных
бактерий, средой обитания большинства
из которых является кишечник человека
и животных. Наиболее значимыми в
эпидемиологическом отношении
представителями кишечной группы являются
представители родов Escherichia,
Salmonella,
Klebsiella,
Proteus, Yersinia.
Другие энтеробактерии очень редко
вызывают развитие госпитальных инфекций.
Энтеробактерии
– короткие палочки от 1 до 5 мкм в длину,
шириной 0,4 – 0,8 мкм. Одни виды подвижны –
перитрихи, другие – лишены органов
движения. Многие обладают фимбриями
(пилями) разных типов, фибриллами,
выполняющими адгезивную функцию, и
половыми пилями, участвующими в
конъюгации. Все представители этой
группы являются факультативными
анаэробами.
Энтеробактерии
хорошо растут на простых питательных
средах, некоторые имеют специфические
потребности в росте. Продуцируют
сахаролитические, протеолитические и
другие ферменты, определение которых
имеет таксономическое значение (см.
табл. 1). За несколькими исключениями,
все ферментируют глюкозу. Большинство
разлагают нитраты до нитритов,
оксидазонегативные.
Ряд энтеробактерий
продуцируют бактериоцины (колицины),
информация о синтезе которых закодирована
в COL-плазмидах.
Колицинотипирование и колициногенотипирование
энтеробактерий как методы внутривидовой
маркировки штаммов применяются в
эпидемиологических целях (для установления
источника и путей передачи возбудителя
кишечных инфекций).
Таблица 1. Дифференциальные признаки
некоторых родов и видов энтеробактерий
Признак | Род | |||||||
Esche-richia | Kleb-siella | Proteus | Salmo-nella | (S. | Shigella | Yersi-nia | (Y. | |
Образование | + | – | – | – | – | ± | – | ± |
Реакция | + | – | + | + | + | + | + | + |
Реакция | – | + | ± | – | – | – | – | – |
Утилизация | – | + | ± | – | – | – | – | – |
Образование | – | – | + | + | – | – | – | – |
Продукция уреазы лизин-декарбоксилазы | – ± | + + | + – | – + | – – | – – | – – | ± – |
Ферментация глюкозы лактозы сахарозы маннита | кг кг в кг | кг к к к | кг – ± – | к – – к | кг – – кг | к – – + | к – – к | к – к к |
Подвижность | + | – | + | + | + | – | – | – |
Обозначения: +– 90 -100% штаммов
положительны;–– 90-100% штаммов
отрицательны; ± – 26-75% штаммов положительны;
к – ферментация углевода с образованием
кислоты; кг – ферментация углевода с
образованием кислоты и газов; в – признак
вариабелен.
Эшерихии
(E.coli)
Эшерихии – это
подвижные или неподвижные палочки,
факультативный анаэроб. В биохимическом
отношении может быть множество
разновидностей, но главное свойство
эшерихий – это разложение глюкозы до
кислоты и газа: они разлагают до кислоты
маннит, лактозу (возможна замедленная
ферментация); как правило, образуют
индол; реакция Фогес-Проскауэра
отрицательна.
Escherichia coli –
постоянный обитатель кишечника человека,
но в ряде случаев она выступает в качестве
этиологического агента при развитии
патологических процессов. Кишечная
палочка вызывает патологию мочевыводящих
путей, у женщин – половых, является
возбудителем послеоперационных
гнойно-септических инфекций, особенно
при абдоминальных, гинекологических и
урологических вмешательствах.
По антигенной
структуре это очень многообразный вид.
Считается, что патология вызывается
определенными антигенными разновидностями,
причем у разных антигенных представителей
Е.coli имеется и достаточно специфичная
локализация при развитии патологического
состояния, а также патогенетические
особенности при их вегетации в организме.
Бактериальная
клетка состоит из трех разновидностей
антигенных субстанций: К-антиген – это
поверхностный или капсюльный антиген.
О – соматический и Н- жгутиковый антиген.
Капсульный антиген может отсутствовать
(у непатогенных вариантов). По своей
химической структуре он не однороден,
встречаются термолабильные и
термостабильные антигены. Надо, однако,
отметить, что ранее считавшиеся
термолабильными так называемые В-антигены
(разновидность К-антигенов) в
действительности весьма термостабильны
(по своей химической структуре – это
полисахариды), но при кипячении культуры
переходят в раствор, оголяя О – антиген.
В растворенной части этот антиген
(гаптен. т.е. вступает в иммунологические
реакции, но не может при введении животным
вызывать формирование антител) легко
выявляется с помощью, как правило
адсорбционных реакций (угольной
агглютинации, латекс-агглютинации и
т.д.).
Соматический
О-антиген, вариантов которого сейчас
насчитывается 164, термостабилен, на этом
основана этиологическая диагностика
инфекции: ставится реакция агглютинации
с живой культурой (реакция за счет
К-антигена) и после ее 2-х часового
кипячения – устанавливается О-антиген.
Подвижные культуры содержат жгутиковый
Н-антиген. Предполагается, что по номеру
Н-антигена можно оценить вирулентность
(патогенность) Е. coli. Всего сейчас учтено
55 Н-антигенов.
Полностью
антигенная структура микробной клетки
обозначается, например, так: К58:0111:Н12.
Сальмонеллы
– это
неспороносные палочки, относящиеся к
семейству энтеробактерий, подвижны –
перитрихи.
В антигенном
отношении имеется дифференциация по
соматическому О-антигену и по жгутиковому
Н-антигену. Пропись сероваров рекомендовано
делать прямым печатным шрифтом и серовар
писать с большой буквы (Salmonella Enteritidis).
Вопрос о таксономии сальмонелл остается
открытым и требует дальнейшего изучения
[И. А. Демин, Е. Б. Брусина, 2006].
В биохимическом
отношении могут быть различные варианты,
но главное, они лактозоотрицательны,
глюкозу разлагают до кислоты и газа
(исключение составляет возбудитель
брюшного тифа).
Сальмонеллы
растут на обычных питательных средах.
Лабораторная диагностика основана на
выделении чистой культуры при посеве
на диагностические дифференциальные
среды (Эндо, Левина, висмут-сульфит агар,
бактоагар Ж и др.) и идентификации по
биохимическим и антигенным свойствам.
Клебсиеллы– это
неподвижные палочки, обладают капсулой,
образуют слизь. Род Klebsiella состоит из 4
видов: K.oxytoca, K.planticola, К. pneumoniae (подвиды:
pneumoniae, ozaenae, rinoscleromatis), K. terrigena.
Клебсиеллы –
факультативные анаэробы. Биохимические
свойства достаточно характерны: глюкоза
расщепляется до кислоты и газа, разлагаются
маннит, лактозу, инозит, сахарозу. Индол
не образуется, H2S
– не образуется, реакция Фогес-Проскауэра
положительная. Дифференциация различных
видов клебсиелл проводится на основании
их неодинаковой способности ферментировать
углеводы, образовывать уреазу и
лизиндекарбоксилазу, утилизировать
цитрат.
В антигенном
отношении различают О-антигены и К-АГ.
Сочетание этих антигенов обусловливает
принадлежность культур к определённым
сероварам. В настоящее время известно
80 К и 11 О антигенов. Некоторые О и К
антигены клебсиелл родственны О –
антигенам эшерихий и сальмонелл.
Капсульный антиген термостабилен (чаще
всего обнаруживают антигены №1-6).
Как правило,
точная идентификация затруднена из-за
отсутствия диагностических иммунных
сывороток. Диагностика в практических
условиях основывается на культуральных
(лактозоположительные слизистые колонии)
и биохимических свойствах. В связи с
выраженной однозначностью биохимических
свойств дискриминантность метода для
выявления госпитальных штаммов
ограничена.
Протеи
– это аэробные, подвижные палочки
(перитрихи). Относятся к свободно живущим.
Распространены в почве, сточных водах,
выделяются с испражнениями человека и
животных.
Биохимические
свойства: лактозоотрицательны, дульцит
отрицательны, мочевина расщепляется,
нитраты редуцируются. Факультативные
анаэробы. Различают 4 разновидности
(вида), которые имеют некоторые различия
в биохимическом отношении. Наибольшее
значение как возбудители госпитальных
инфекций имеют P.vulgaris и P.mirabilis.
Подвижные варианты
протеев обладают свойством “роения”,
т.е. быстрого распространения по всей
поверхности твердой питательной среды.
В антигенном
отношении имеется дифференциация по
О- и Н-антигену. Внутри видов штаммы
различаются по антигенным свойствам
(серовары) и по отношению к фагам
(фаговары),что позволяет установить
эпидемиологические связи.
Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]
- #
- #
- #
- #
- #
- #
- #
- #
- #
- #
- #
Источник