Лабораторная диагностика кишечных протозоозов

Протозооскопия– исследование с помощью микроскопа нативных мазков или окрашенных микропрепаратов простейших. При исследовании нативных мазков на предметное стекло наносят биологический материал, например, фекалии, содержимое 12-перстной кишки, мокроту и др. Если исследуемый материал густой, то на предметное стекло добавляют физиологический раствор и с помощью деревянной лучинки готовят равномерную смесь. Все простейшие и их цисты в нативных мазках бесцветны.

Вегетативные формы некоторых простейших обладают характерной для каждого вида подвижностью, что позволяет легко их обнаружить при изучении микропрепарата.

Цисты лучше выявляются при окрашивании нативных мазков раствором Люголя. При небольшом количестве цист в исследуемом материале применяют различные методы концентрирования, основанные на всплывании цист в растворах с высоким удельным весом (растворы сернокислой меди, сернокислого цинка, сахара) или осаждении в жидкостях с низким удельным весом (эфирно-формалиновая смесь).

Для обнаружения паразитов в крови используют метод толстой капли или исследуют тонкий мазок, окрашенный по Романовскому-Гимзе.

Культивирование– посев биологических материалов на питательные среды. После инкубирования простейших в термостате проводят микроскопическое исследование. Для культивирования простейших чаще используют жидкие питательные среды, главными компонентами которых являются сыворотка крови или яичный белок с добавлением солей, аминокислот, витаминов и других веществ. Метод позволяет значительно увеличить вероятность обнаружения паразитов в тканях хозяина. Культивирование простейших также используется для изучения их антигенных особенностей и оценки влияния лекарственных средств на паразитов.

Иммунологические методынаправлены на определение в сыворотке крови антител, образующихся в организме хозяина в результате инвазии, или на обнаружение в фекалиях больного антигенов возбудителя. Иммунологические методы используются при лабораторной диагностике лямблиоза, амебиаза, малярии.

ПЦР – диагностика (полимеразная цепная реакция) –выявление ДНК возбудителя в биологических пробах (кровь, моча, кал, соскобы с слизистых оболочек и т.д.).

Метод биологических проб – заражение лабораторных животныхприменяется для изучения патогенных свойств возбудителей и определения эффективности лекарственных препаратов против паразитических простейших, а также для уточнения диагноза заболевания. В качестве животных используют крыс, мышей, морских свинок, золотистых хомячков. Животным внутрибрюшинно вводится биологический материал от больного, чаще всего сыворотка крови или суспензия клеток пораженного органа. Через 2 – 3 недели животных забивают, делают микропрепараты из различных органов, которые затем микроскопируют с целью обнаружения паразита.

Балантидий Balantidium coli

Тип: Ciliophora Класс: Litostomatea Отряд: Vestibuliferida Род: Balantidium Вид: Balantidium coli	· Балантидий впервые был обнаружен у свиней немецкими протозоологами Р. Лейкартом и Ф. Штейном в 1862 г. · Паразит распространен повсеместно. · Паразитирует в организме человека и свиней. · У человека паразитирует вид – Balantidium coli. · Заболевание – балантидиаз -антропозооноз. · Резервуар – свиньи, балантидиаз чаще встречается у сельских жителей, которые занимаются свиноводством.
Рис. 8. Строение Balantidium coli	· Длина: 30 – 200 мкм, ширина: 20 – 110 мкм. · Тело несимметричное, покрыто продоль-ными рядами коротких ресничек (органы движения). · Характерная особенность – наличие двух ядер: макронуклеус (крупное полиплоид-ное) и микронуклеус (маленькое диплоид-ное). · Размножение: бесполое (поперечное деление) и половое (конъюгация). · Две формы: трофозоит и циста. · Цисты (50 – 60 мкм) округлые, окружены двойной оболочкой, имеет макронуклеус.

Рис. 9. Жизненный цикл балантидия

Балантидии в кишечнике свиней образуют цисты, которые выходят наружу с фекалиями.

Пути заражения человека – перорально (фекально-орально) при проглатывании цист с загрязненными овощами, водой, с немытых рук (при забое свиней, использовании свиного навоза в качестве удобрения и при загрязнении им источников воды).

Цисты могут распространяться мухами.

Возможна передача вегетативной формы от человека к человеку.

Из проглоченных цист выходят трофозоиты, которые живут и размножаются в просвете толстого кишечника.

Во многих случаях заболевание протекает бессимптомно и развивается цистоносительство. У больных с клиническими проявлениями в стенке толстого кишечника находят поражение слизистой кишечника, язвы на стенках кишечника, развивается диарея. При балантидиазе паразиты не распространяются в организме гематогенно.

Источник

Для
лабораторных исследований на кишечные
гельминтозы и протозоозы человека
наиболее часто требуется отобрать кал
и отпечаток (соскоб) с перианальных
складок. В кале можно обнаружить яйца
аскарид, широкого лентеца, описторха,
кишечных простейших и других возбудителей
паразитарных болезней. Отпечатки
(соскобы) с перианальных складок более
эффективны для лабораторной диагностики
энтеробиоза и тениидозов (бычьего и
свиного цепня).

Пробы
биоматериала для проведения
паразитологических исследований
направляют в лабораторию в соответствии
с МУ 4.2.2039-05 «Техника сбора и транспортирования
биоматериалов в микробиологические
лаборатории»: при наличии клинических
показаний; при обследовании декретированных
контингентов (работники общепита,
детских образовательных учреждений,
плавательных бассейнов и др); при плановом
обследовании населения.

Согласно
СП 3.2.3110-13 «Профилактика энтеробиоза»
плановые профилактические обследования
детей и обслуживающего персонала в
детских дошкольных коллективах и
коллективах младшего школьного возраста
проводятся один раз в год (после летнего
периода, при формировании коллектива)
и (или) по эпидемическим показаниям.

Что
нужно знать при отборе проб биоматериалов
человека для проведения лабораторного
исследования на кишечные паразитозы.

Как
отобрать соскоб с перианальных складок?
В соответствии с МУ 4.2.2039-05 «Техника
сбора и транспортирования биоматериалов
в микробиологические лаборатории»:

Посуду,
предметное стекло получают в лаборатории
накануне.
Пациенту
не следует принимать душ и подмываться
вечером накануне отбора пробы.
Пробу
следует отобрать рано утром, когда
пациент (обследуемый) только проснулся,
до дефекации и душа.
Соскоб
методом «отпечатка». Отклеить полоску
липкой ленты от предметного стекла,
держа полоску за концы, плотно прижать
всей липкой поверхностью к анусу и
перианальным складкам, не касаясь
пальцами перианальной области.
Отклеивают полоску от кожи перианальной
области и переносят на предметное
стекло липким слоем вниз, приклеивают
к стеклу равномерно для избежания
образования пузырьков воздуха.
Е
сли
в области перианальных складок есть
язвы или воспаления, то пользуются
ватным тампоном на шпателе, помещённом
в пробирку. Тампон смачивают в
глицерине.
С
оскоб
с применением стеклянных глазных
палочек с клеевым слоем. Взять отпечаток
путем плотного прижатия плоских частей
глазной лопаточки к коже перианальных
складок. Укрепить палочку в штативе
или пенициллиновых пузырьках для
доставки в лабораторию.

Как
отобрать фекалии для паразитологического
исследования?
В соответствии с МУ 4.2.2039-05 «Техника
сбора и транспортирования биоматериалов
в микробиологические лаборатории»:

Перед
сбором пробы не принимать антигельминтные,
антидиарейные препараты, минеральное
масло, висмут, барий, активированный
уголь и др. Допустимы солевые и
растительные слабительные, если они
необходимы пациенту.
Посуда
для сбора материала – это чистая
(прокипячённая) сухая стеклянная банка
или одноразовый контейнер с широким
горлом и плотно закрывающимися
крышками.
Фекалии
(утреннюю порцию) после дефекации
собирают в посуду из разных участков
в объёме не менее 50г, не загрязняя
внешние края контейнера.
Контейнер
с пробой доставляют в лабораторию в
полиэтиленовом мешке. При отсутствии
возможности доставки пробы в лабораторию
в течение 1-2 часов, материал рекомендуется
хранить при температуре 4-8 град. С.

При
подозрении на активное выделение
члеников гельминтов
(активное выделение члеников подобно
актам непроизвольной дефекации):

Необходимо
протереть область перианальных
складок чистой ватой, вату поместить
в чистую баночку, добавить небольшое
количество воды (кипячёной, охлаждённой),
доставить в лабораторию.
Если
членики (лапшевидные молочно-белые
образования) остались на белье, их тоже
нужно собрать ватой и положить в
ёмкость для лабораторного исследования.

При пассивном выделении члеников гельминтов
в фекалиях можно увидеть лапшевидные
молочно-белые образования размером
1см х 3см и более. Эти фрагменты нужно
доставить в лабораторию вместе с
фекалиями.

При подозрениях
на паразитарные заболевания обращайтесь
к врачу!

Источник

Диагностика протозойных болезней. Диагностика гельминтозов

У человека возбудителями протозойных болезней могут быть некоторые патогенные простейшие животные (тип Protozoa). К их числу относятся: амебиаз, лямблиоз, балантидиаз, вагинальный трихомониаз, лейшманиозы (висцеральный и кожный), малярия, токсоплазмоз, кокцидиоз, пневмоцистоз (интерстициальная пневмония у детей; у ВИЧ-инфицированных выделяют Pneumocysta carinii).

Методы лабораторной диагностики заболеваний, вызываемых простейшими, обитающими в кишечнике человека (амебы, лямблии, балантидии, кокцидии), идентичны. Из 6 видов амеб, обнаруживаемых в кишечнике человека, патогенен лишь один вид амебы – Entamoeba histolytica, который, помимо язвенного поражения толстой кишки и бессимптомного носительства, может вызывать внекишечные поражения: печени (абсцессы печени, чаще поддиафрагмальные, гнойные гепатиты), легких, головного мозга, кожи и других органов.

Из жгутиковых простейших безусловно патогенной является Lamblia intestinalis, которая вызывает неустойчивый стул, рецидивирующие энтериты, иногда протекающие с дизентериеподобной клиникой, а также поражения печени и желчного пузыря (гепатиты, холециститы, холангиты). Возможно бессимптомное носительство лямблий, которые служат источником заражения здоровых людей.

Из споровиков в кишечнике человека паразитирует один вид -Ysospora belli, вызывающий сравнительно редко встречающийся кокцидиоз. Инфузория – Balantidium coli вызывает у человека балантидиаз, источником инфекции при котором часто являются свиньи; заболевание протекает в виде колитов, часто рецидивирующих, иногда эрозивно-язвенных.

Лабораторный диагноз протозойных заболеваний ставится на основании обнаружения в кале (свежем, теплом), соскобах со слизистой кишки (при сигмоскопии и колоноскопии), в пунктатах абсцессов и других цист и вегетативных форм простейших, правильная идентификация которых и частота находок зависят от квалификации работников клинической лаборатории.

В последние годы появилась возможность культивирования простейших, а также проведения серологических реакций и аллергических проб, в частности, при обследовании на лейшманиоз и токсоплазмоз. Большое клиническое значение (нередко – решающее и определяющее судьбу больного малярией) имеет умение находить в периферической крови плазмодиев малярии как в мазках крови, так и методом «толстой капли».

диагностика гельминтозов

Диагностика гельминтозов

Сходная клиническая картина при различных гельминтозах, а также наличие общих симптомов с заболеваниями желудочно-кишечного тракта другой этиологии (протозоозы, хронические колиты, частые дуодениты и др.) выдвигает на первый план значение лабораторного диагноза.

Для обнаружения гельминтов исследуют фекалии, дуоденальный сок, желчь, ректальную и перианальную слизь, мокроту, мочу, мышечную ткань, кожу, кровь и др. Исследуют фекалии не более суточной давности; берут около столовой ложки из разных мест в чистую стеклянную посуду (например, в хорошо отмытый пенициллиновый флакончик). Сначала фекалии осматривают невооруженным глазом для выявления аскарид, остриц, члеников цестод. Для оценки эффективности дегельминтизации исследуют всю суточную порцию фекалий в период лечения и несколько дней спустя. Фекалии, смешанные с водой, просматривают небольшими порциями в проходящем свете на черном фоне в чашках Петри или черной кювете. Для обнаружения мелких гельминтов (самцов остриц, трихинелл и др.) все подозрительные комочки кала помещают в каплю воды на предметное стекло и просматривают с помощью лупы

Основной поиск яиц и члеников гельминтов проводят после применения специальных способов (отстаивания, обогащения, всплывания и др ) Исследуют фекалии и нативные мазки на предметных стеклах, под микроскопом при малом увеличении (в 60-80 раз) в затемненном поле зрения Подозрительные находки сверяют с оригиналом (имеются специальные атласы или рисунки для идентификации гельминтов)

Для лабораторной диагностики гельминтозов применяются также серологические и аллергологические методы Серологические реакции (РСК) ставят с антигенами из ткани гельминтов (аскарид, трихинелл), на латексе – при эхинококкозе и цистецеркозе головного мозга. РГА применяется для диагностики шистосомозов, трихинеллеза, эхинококкоза.

Внутрикожные аллергические пробы со специально приготовленными аллергенами применяют для диагностики эхинококкоза, филяриоза, парагонимоза Некоторые пациенты эти пробы переносят тяжело, с развитием общих аллергических реакций вплоть до анафилактического шока, что следует учитывать при их назначении (внутрикожные пробы нежелательно проводить лицам с отягощенным аллергоанамнезом)

В стадии обызвествления некоторых гельминтов в тканях и органах для их обнаружения оказался эффективным рентгенологический метод, в частности, для диагностики эхинококкоза (легких, плевры), цистецеркоза (мышц), мочеполового шистосомоза Возможно также применение УЗИ и компьютерной томографии (КТ) при некоторых видах гельминтозов.

– Также рекомендуем “Диагностика грибковых заболеваний. Лечение инфекционных болезней”

Оглавление темы “Диагностика инфекционных заболеваний”:

1. Кровь при кровяных инфекциях. Гемограмма при рикетсиозах

2. Кровь при лейшманиозе. Гемограмма при поражении наружных покровов

3. Кровь при патологии наружных покровов. Подтверждение инфекционного диагноза

4. Диагностика бактериальных инфекций. Бактериологическое и серологическое исследование

5. Аллергологические диагностические пробы. Диагностика вирусных инфекций

6. Диагностика риккетсиозов. Лабораторное выявление риккетсиозов

7. Диагностика протозойных болезней. Диагностика гельминтозов

8. Диагностика грибковых заболеваний. Лечение инфекционных болезней

9. Лекарственная терапия инфекций. Химиотерапия инфекционных заболеваний

10. Радикальная терапия инфекций. Многокомпонентная терапия инфекционных заболеваний

Источник

Балантидий Balantidium coli

Тип: Ciliophora Класс: Litostomatea Отряд: Vestibuliferida Род: Balantidium Вид: Balantidium coli	· Балантидий впервые был обнаружен у свиней немецкими протозоологами Р. Лейкартом и Ф. Штейном в 1862 г. · Паразит распространен повсеместно. · Паразитирует в организме человека и свиней. · У человека паразитирует вид – Balantidium coli. · Заболевание – балантидиаз -антропозооноз. · Резервуар – свиньи, балантидиаз чаще встречается у сельских жителей, которые занимаются свиноводством.
Рис. 8. Строение Balantidium coli	· Длина: 30 – 200 мкм, ширина: 20 – 110 мкм. · Тело несимметричное, покрыто продоль-ными рядами коротких ресничек (органы движения). · Характерная особенность – наличие двух ядер: макронуклеус (крупное полиплоид-ное) и микронуклеус (маленькое диплоид-ное). · Размножение: бесполое (поперечное деление) и половое (конъюгация). · Две формы: трофозоит и циста. · Цисты (50 – 60 мкм) округлые, окружены двойной оболочкой, имеет макронуклеус.

Рис. 9. Жизненный цикл балантидия

Балантидии в кишечнике свиней образуют цисты, которые выходят наружу с фекалиями.

Цисты могут распространяться мухами.

Возможна передача вегетативной формы от человека к человеку.

Из проглоченных цист выходят трофозоиты, которые живут и размножаются в просвете толстого кишечника.

Основной метод диагностики

Паразитологический (микроскопическое исследование мазка свежевыделенных фекалий больного на наличие вегетативных форм и цист паразита). Цисты в фекалиях человека обнаруживают редко. Возможно паразитологическое исследование материала, взятого из-под края язвы при ректороманоскопии. Микроскопическое исследование мазков при отрицательном результате повторяют многократно на протяжении 10 – 12 дней.

Культуральный метод заключается в посеве фекалий больного на среду Павловой и др. Балантидии на различных питательных средах живут недолго из-за отсутствия при культивировании полового процесса – конъюгации.

Эндоскопические методы (ректороманоскопия, фиброколоноскопия) позволяют обнаружить типичные изменения стенки кишечника и получить биопсийный материал из пораженных участков с целью выявления вегетативных форм балантидиев.

Профилактика

· Соблюдение правил личной гигиены.

· Предупреждение загрязнения окружающей среды необеззараженными фекалиями свиней.

· Ветеринарный контроль свиней на фермах.

· Борьба с летающими насекомыми – механическими переносчиками.

II. Самостоятельная работа обучающихся на занятии

Для эффективной работы на практическом занятии ознакомьтесь с методическим материалом.

Дополните предложения

1. Простейшие – это…

2. Медицинская протозоология изучает…

3. Медицинское значение имеют представители следующих типов…

4. Питание простейших осуществляется…

5. Простейшие размножаются путем…

6. Жизненными формами простейших являются…

7. Иммунологические методыисследования протозоозов направлены на…

8. В организме человека балантидий локализуется в…

9. Заражение балантидиазом происходит на стадии…

Заполните таблицу

Характеристика балантидия

Систематика: тип, класс, вид (представитель)
Географическое распространение
Форма паразитирования
Медицинское значение (заболевание)
Жизненный цикл (есть или нет смена хозяев)
Формы существования
Хозяева
Локализация в организме человека
Влияние на организм хозяина
Пути проникновения
Инвазионная стадия
Переносчики
Лабораторная диагностика
Профилактика

3. Изучите морфологию вегетативной формы и цисты балантидия. Нарис. 12 сделайте обозначения.

III. Контрольные задания

Блиц-опрос

1. Характеристика царства Protista (простейшие).

2. Какое количество видов паразитических простейших вызывают протозоозы у людей?

3. Перечислите основные компоненты клетки простейшего.

4. Перечислите способы передвижения простейших.

5. Перечислите способы размножения простейших.

6. Что такое бинарное деление? В чем отличие бинарного деления от шизогонии?

7. Опишите процесс копуляции и коньюгации.

8. Что такое инцистирование и эксцистирование? Биологическое значение образования цист.

9. Перечислите основные жизненные формы простейших. Какие формы жизненных циклов простейших Вам известны?

10. В каких случаях развивается гуморальный иммунитет у человека в ответ на протозойную инвазию?

11. Методы лабораторной диагностики паразитарных болезней.

12. Balantidium coli (балантидий): морфологические особенности, жизненный цикл, резервуар, пути заражения человека, локализация, диагностика, профилактика, географическое распространение.

Источник