Методы исследований на кишечные простейшие

Кишечные простейшие представлены амебами и жгутиковыми. Выделяют две диагностические стадии: вегетативная стадия или трофозоит и покоящаяся стадия или циста. Как первая, так и вторая стадии могут выделяться с фекалиями. Трофозоиты обычно обнаруживаются в жидких или полужидких фекалиях; цисты обычно встречаются в оформленном стуле. Однако как одна, так и другая стадии могут обнаруживаться в одной и той же пробе фекалий.

Трофозоиты и цисты можно наблюдать и в нативных препаратах фекалий с физиологическим раствором. В ряде случаев видовая идентификация может потребовать исследования окрашенных препаратов.

1. ИССЛЕДОВАНИЕ ИСПРАЖНЕНИЙ.

Испражнения (кал) исследуют с целью обнаружения простейших кишечника. Все больные острыми и хроническими кишечными заболеваниями, в первую очередь при наличии крови и слизи в стуле, должны подвергаться лабораторному обследованию на зараженность простейшими.

Движение простейших – один из самых характерных признаков, который позволяет поставить правильных диагноз. Поэтому основное правило – исследование только свежего материала, не позже, чем через 20-30 мин после его выделения. При невозможности немедленного исследования испражнения помещают в консервант (не заменяет нативных мазков). Исследование на цисты простейших допускается в течение суток.

В первую очередь выбирают и исследуют неоформленные фекалии с патологическими примесями, так как в них можно обнаружить подвижные формы патогенных простейших.

В плотном оформленном стуле содержатся только цисты. Они более устойчивы, чем вегетативные формы, поэтому оформленный кал можно исследовать и через более поздние сроки, но, как правило, в день взятия.

А). Исследование мазков фекалий. Обязательным является исследование нативного мазка и мазка, окрашенного раствором Люголя.

Нативный мазок. Препарат готовится на предметном стекле без добавления изотонического раствора хлорида натрия. В нативном мазке обнаруживают подвижные формы простейших, по особенностям движения можно диагностировать отдельные виды.

Окраска раствором Люголя. Цисты отличаются постоянной формой и наличием оболочек. Строение цист видно плохо, не просматриваются ядра. Поэтому исследуют и мазок, окрашенный раствором Люголя. Цисты окрашиваются в золотичто-коричневый цвет. На фоне цитоплазма заметны ядра, видны их строение и число. Хорошо виден гликоген, окрашивающийся в разные оттенки коричневого цвета. При окраске раствором Люголя вегетативные формы погибают и определяются с трудом.

Б). Методы обогащения или накопления цист. Применяются только с целью обнаружения цист. Для исследования жидких фекалий, в которых, как правило, обнаруживаются вегетативные формы простейших, эти методы не пригодны.

Метод всплывания. При смешивании материала, содержащего цисты, с жидкостями, имеющими бóльшую относительную плотность, чем цисты, последние всплывают и находятся в поверхностной пленке. Предварительно отмывают цисты от фекалий, затем цетрифугируют. После этого к осадку добавляют 33% раствор сульфата цинка. Центрифугируют, исследуют поверхностную пленку, которую снимают петлей.

Метод формалин-эфирного обогащения. При обработке фекалий по этому методу происходит отделение и концентрация цист простейших кишечника.

2. ИССЛЕДОВАНИЕ КРОВИ.

С целью обнаружения гемопаразитов микроскопируют с иммерсионным маслом под большим увеличением мазок и толстую каплю крови.

Толстую каплю с отличие от мазка не фиксируют. Под влиянием водных красителей нефиксированные эритроциты гемолизируются, препарат становится прозрачным. Это ускоряет и облегчает обнаружение паразитов, так как в одном поле зрения можно исследовать гораздо больший объем крови, чем в мазке.

Окраску проводят по Романовскому-Гимзе. Раствор красителя должен быть слабо щелочной (рН 7,1-7,2). Для этой цели краску разводят физиологическим раствором. Правильно окрашенная толстая капля имеет фиолетовый цвет.

3. ИССЛЕДОВАНИЕ ВЫДЕЛЕНИЙ МОЧЕПОЛОВЫХ ПУТЕЙ.

Выделения мочеполовых путей исследуют для обнаружения мочеполовых трихомонад. Трихомонады легко отличить от лейкоцитов и других клеток по характерному движению, наличию жгутиков и ундулирующей мембраны. Более четко они видны при использовании темнопольной или фазово-контрастной микроскопии.

Просмотр нативных и окрашенных препаратов способствует эффективности лабораторного исследования.

4. ИССЛЕДОВАНИЕ ДРУГИХ БИОЛОГИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ.

А). Желчь и содержимое 12-перстной кишки, полученные при дуоденальном зондировании, осматривают и микроскопируют комочки слизи. Кроме того, материал центрифугируют, просматривают под микроскопом осадок. С помощью этого метода можно обнаружить вегетативные стадии лямблий.

Б). Спинномозговую жидкость, полученную при пункции, центрифугируют и исследуют осадок. Из осадка готовят нативные мазки, окрашивают их по Романовскому и микроскопируют. В препаратах можно обнаружить патогенных амеб, токсоплазм, трипаносом.

В). В гное, извлеченном при пункции абсцессов внутренних органов, микроскопически можно обранужить амеб. Из язв толстого кишечника получают отделяемое и немедленно микроскопируют – при этом можно выявить подвижные вегетативные стадии (эритрофаги) дизентерийной амебы.

Г). Мокроту исследуют в нативном мазке, а также окрашивают раствором Люголя. В мокроте можно обнаружить пневмоцисты, изредка ротовые амебу и трихомонаду.

Д). Костный мозг исследуют с целью обнаружения лейшманий и некоторых других простейших. Получают костный мозг при пункции грудины, гребня подвздошной или головки большеберцовой костей, готовят мазки на предметных стеклах и микроскопируют после окраски по-Романовскому.

Е). При кожных поражениях исследуют мазки в случае подозрения на кожный лейшманиоз. Исследуют кожу из области вокруг язвы и в зоне инфильтрата по краю язвы. Лейшмании обнаруживают в макрофагах, а также вне клеток в виде овальных или удлиненных телец размером 3-5 мкм.

Не рекомендуется брать материал непосредственно из язв, так как наличие микрофлоры и остатков разрушенных клеток затрудняют поиски лейшманий.

Ж). Лимфатические узлы пунктируют, полученный материал исследуют для приготовления окрашенных мазков, посева на питательные среды и биологической пробы с целью обнаружения лейшманий, трипаносом, токсоплазм.

З). В некоторых случаях приходится исследовать кусочки органов или тканей, полученных во время операции (биопсия) или вскрытия (аутопсия). В частности, это необходимо для обнаружения токсоплазм и их цист в гистологических срезах из головного мозга, печени, селезенки, а также пневмоцист в препаратах из легких.

5. СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ.

Протозойные болезни сопровождаются выработкой иммунитета и появлением в сыворотке крови антител, на обнаружении которых основаны серологические методы исследований.

С указанной целью применяют

· реакцию связывания комплемента – РСК (токсоплазмоз),

· реакцию гемагглютинации – РГА (трихомоноз, токсоплазмоз),

· реакцию иммунофлюоресценции – РИФ (малярия, лейшманиоз, пневмоцистоз, амебиаз, токсоплазмоз),

· реакцию антител, меченных ферментами – РЭМА (лейшманиоз, токсоплазмоз, амебиаз, малярия) и др.

Например, на мазки-отпечатки с паразитом наносят капли исследуемой сыворотки в различных разведениях и затем – люминесцирующую сыворотку. Если в исследуемой сыворотке имелись антитела, то вокруг клеток паразита в мазке образуются светящиеся ореолы, наблюдаемые при микроскопии препаратов в люминесцентном микроскопе.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском гугл на сайте:

[02-012]
Анализ кала на цисты простейших

340 руб.

Микроскопическое исследование кала, целью которого является выявление цист форм простейших.

Синонимы английские

Ova and Parasite Exam, O&P, Parasitic Examination, Stool.

Метод исследования

Микроскопия.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Кал.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонны, пилокарпина и др.) и на окраску кала (железа, висмута, сернокислого бария), в течение 72 часов до сбора кала.

Общая информация об исследовании

Анализ кала на цисты простейших – это микроскопическое исследование, которое используется для поиска паразитов, инфицирующих нижние отделы пищеварительного тракта, откуда они попадают в стул. Берется тонкий мазок стула на предметном стекле, который затем окрашивается, после чего паразиты в виде цист могут быть обнаружены.

Существует множество паразитов, способных инфицировать человека. У каждого типа специфический процесс созревания, жизненный цикл. Некоторые из них, прежде чем инфицировать человека, проводят часть жизни в промежуточных хозяевах, таких как овцы, коровы, улитки. У большинства паразитов несколько стадий развития, у многих есть зрелые и цистные формы.

Люди, инфицированные гастроинтестинальными паразитами, как правило, заражаются через воду или пищу, в которых содержатся цисты. Эти микроорганизмы выделяются со стулом инфицированного человека или животного и могут затем попасть опять же в любую воду, пищу или на какую-либо поверхность.

Паразитарная инфекция особенно опасна для определенных групп людей: детей, пожилых, пациентов с ослабленной иммунной системой, например ВИЧ-инфицированных. В таких случаях заражение может приводить к серьезным симптомам и осложнениям.

Те, кто путешествует за пределы страны, особенно в развивающиеся страны, больше остальных подвержены опасности: в местах с теплым климатом и там, где вода для пользования очищается недостаточно, паразитов особенно много.

В целях постановки точного диагноза вместе с анализом кала на цисты простейших иногда используются и другие методы, например тесты на антигены лямблий, микроскопия стула на наличие яиц гельминтов. Серологические методы диагностики позволяют определить белковые структуры паразитов и идентифицировать их, даже если самих паразитов не видно в стуле. Однако, поскольку тесты на антигены выявляют лишь несколько конкретных паразитов, они не являются заменой данного исследования, которое способно определить большее их количество.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики причины продолжительной диареи.
• Чтобы определить, есть ли паразиты в нижних отделах пищеварительного тракта, и, если есть, идентифицировать их.
• Для контроля за эффективностью противопаразитарной терапии.

Когда назначается исследование?

• Если есть подозрение, что человек употребил загрязненную воду или пищу, например недавно выпил ручьевую или озерную воду, посещал страны с жарким климатом, контактировал с кем-либо, кто заражен. Кроме того, на заражение указывают следующие симптомы:
  • продолжительная диарея,
  • боль в животе,
  • тошнота, рвота,
  • кровь, слизь в стуле.
• Для контроля терапии паразитарной инвазии.

Что означают результаты?

Референсные значения

Наличие цист простейших в кале указывает на инвазию и позволяет подтвердить предполагаемый диагноз.

Отрицательный результат исследования не всегда означает отсутствие простейших в организме. Он может быть связан с небольшим количеством простейших в исследуемом образце, а также с их жизненным циклом (в некоторые периоды цисты могут не выделяться с калом). Для уверенности в результате рекомендуется повторить анализ через 3-7 дней.



Важные замечания

• Микроорганизмы, вызывающие эти заболевания, иногда выводятся сами, но могут войти в циклическое развитие, тогда симптомы заражения могут затихать, после чего состояние человека будет ухудшаться снова.
• У пациентов с крепким иммунитетом криптоспоридии обычно исчезают уже через несколько недель. При ослабленной иммунной системе (из-за ВИЧ, трансплантации органов, рака и др.) криптоспоридиоз может быть опасен, становясь хроническим и вызывая истощение.

Также рекомендуется

• Анализ кала на яйца гельминтов
• Лейкоцитарная формула

Кто назначает исследование?

Терапевт, педиатр, гастроэнтеролог, инфекционист.