Методы посев на дисбактериоз
Посев кала на дисбактериоз – бактериологическое исследование фекалий, позволяющее определить состояние кишечной микрофлоры. Это наиболее распространенный и доступный метод диагностики дисбактериоза кишечника у детей и взрослых.
Общее представление об исследовании
Образец кала, доставленный в лабораторию, разводят физиологическим раствором, обрабатывают на центрифуге и высевают на специальные питательные среды-агары. Затем чашки со средами ставят в термостат, где создаются благоприятные условия для роста и размножения микроорганизмов. Через 5-7 дней оценивают результат:
- определяют видовой состав микроорганизмов, выросших на питательных средах;
- подсчитывают количество колоний бактерий;
- при выявлении патогенной флоры проводят тест на чувствительность к бактериофагам и антибиотикам.
Как правильно сдавать анализ?
Для получения достоверного результата разработаны рекомендации по подготовке к процедуре, сбору и транспортировке биологического материала.
Подготовка к исследованию
Подготовку к сдаче анализа начинают за 72 часа:
- исключают из рациона острое, алкогольные напитки;
- по согласованию с врачом отменяют медикаменты, которые могут повлиять на результаты исследования: слабительные (таблетки и свечи), препараты железа и висмута, антибиотики, пробиотики;
- запрещено ставить клизмы;
- рентгенологические исследования кишечника с барием переносят на другое время.
Подготовка тары
Кал для бактериологического анализа собирают в стерильную ёмкость, которую нужно подготовить заранее:
- приобрести в аптеке специальный пластиковый контейнер с ложечкой для сбора фекалий;
- взять стеклянную баночку объемом 80-100 мл (например, от детского питания), простерилизовать ее в микроволновой печи примерно 3-5 минут, крышку прокипятить;
- в некоторых частных лабораториях выдают набор для анализа на дисбактериоз, в который входит ёмкость с питательной средой-консервантом, ложечка для сбора кала, перчатки.
Сбор материала
Кал на дисбактериоз собирают утром после пробуждения. Если не получается сходить в туалет после ночного сна, уточните в лаборатории время приёма анализов. Как правило, это первая половина дня.
- Подготовьте место для сбора кала: возьмите судно, горшок или подкладную клеёнку, чисто вымойте и вытрите насухо. Запрещено собирать фекалии из унитаза. У маленьких детей допускается использовать пеленку или памперс.
- Перед дефекацией помочитесь в унитаз. Кал не должен контактировать с мочой.
- После дефекации возьмите подготовленную заранее тару, наденьте стерильные резиновые перчатки и ложечкой соберите материал из разных участков. Старайтесь, чтобы ложечка не касалась судна. Для проведения исследования требуется не менее 5 г фекалий – это комок размером с грецкий орех, в случае жидкого стула – уровень высотой 1,5-2 см.
- Закройте крышку тары.
- Подпишите на баночке свою фамилию, инициалы и дату рождения.
Сроки и условия хранения кала
Основные обитатели кишечника являются анаэробами, поэтому погибают под действием кислорода. Для получения достоверного результата собранный кал должен быть доставлен в лабораторию в течение 2 часов. Максимально допустимое время хранения биоматериала при температуре 4-8 °С составляет 6 часов. До отправки в лабораторию поставьте ёмкость в холодильник. Для транспортировки используйте хладагенты.
Расшифровка результатов
В кишечнике живёт более 400 видов бактерий. Примерно 20 из них имеют клиническое значение. В бланке результата анализа указывают основные микроорганизмы и их количество на 1 г биоматериала. Единица измерения – КОЕ/г.
Нормальные бактерии
Микроорганизмы этой группы составляют до 98% всех кишечных бактерий. Они участвуют в переваривании пищи, синтезе витаминов, сдерживают рост патогенной микрофлоры. Нормальные бактерии входят в состав препаратов-пробиотиков, которые назначают для коррекции дисбактериоза.
- бифидобактерии – 108 – 1010;
- лактобактерии – 106 – 108;
- типичные кишечные палочки – 106 – 108.
Условно-патогенные бактерии
Условно-патогенная флора присутствуют в каловых массах в небольшом количестве. Бактерии расщепляют компоненты пищи, стимулируют работу иммунной системы. Превышение допустимых норм нарушает работу пищеварительного тракта, провоцирует аллергические реакции.
- кишечные палочки лактозонегативные – не более 105;
- бактерии рода протей – не более 102;
- энтерококки – 106 – 107;
- дрожжеподобные грибы – не более 104.
Патогенные бактерии
Эти микроорганизмы вызывают инфекционные заболевания. У здоровых людей патогенные бактерии в каловых массах отсутствуют.
- сальмонеллы;
- шигеллы;
- золотистый стафилококк;
- синегнойная палочка;
- гемолитические кишечные палочки.
При выявлении патогенного микроорганизма указывают его вид и чувствительность к бактериофагам и антибиотикам.
Чтобы отличить истинный дисбактериоз от кратковременных дисбиотических реакций, посев кала назначают дважды с интервалом в 1 неделю. При стойких изменениях микробиоценоза кишечника результаты обоих анализов будут одинаковыми. Врач сопоставит полученные данные с клиническими проявлениями и определит дальнейшую тактику ведения пациента.
Источник
[10-065]
Дисбактериоз кишечника
1500 руб.
Микробиологическое исследование, которое позволяет оценить состав микрофлоры кишечника – концентрацию и соотношение “полезных”, условно-патогенных и патогенных микроорганизмов в кале, определить специфическую активность основных пробиотиков в отношении выявленных микроорганизмов и их чувствительность к бактериофагам и антибиотикам. К нормальной микрофлоре кишечника (“полезные” бактерии) относятся лактобактерии, бифидобактерии, энтерококки, кишечные палочки (типичные), анаэробная флора (бактероиды). Условно-патогенная флора – это энтеробактерии, неферментирующие бактерии, стафилококки, анаэробные бактерии (клостридии), грибы. Патогенными микроорганизмами являются сальмонеллы, шигеллы, патогенные эшерихии. При выявлении патогенных и/или условно-патогенных микроорганизмов будет определена их чувствительность к антимикробным препаратам (антибиотикам и бактериофагам) и пробиотикам. При обнаружении микроорганизмов, составляющих нормальную микрофлору, чувствительность к антибиотикам и бактериофагам не определяется, т.к. не имеет диагностического значения.
Синонимы русские
Дисбиоз кишечника, определение пробиотиков-антагонистов.
Синонимы английские
Intestinal dysbiosis, antagonistic activity of probiotics and bacteriophage sensitivity test, Intestinal dysbacteriosis.
Метод исследования
Микробиологический метод.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Кал.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Исследование рекомендуется проводить до начала приема антибиотиков и других антибактериальных химиотерапевтических препаратов.
- Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить (по согласованию с врачом) прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонна, пилокарпин и др.), и препаратов, влияющих на окраску кала (железо, висмут, сернокислый барий), в течение 72 часов до сбора кала.
Общая информация об исследовании
Дисбактериоз (дисбиоз) кишечника – это нарушение состава и количественного соотношения бактериальных и грибковых микроорганизмов желудочно-кишечного тракта. В норме слизистая оболочка ЖКТ является средой обитания так называемых комменсальных микроорганизмов, обеспечивающих целый ряд защитных функций в обмен на микронутриенты, используемые человеком. Большинство кишечных комменсалов относятся к родам Lactobacillus, Bifidobacterium и Bacteroides (облигатные бактерии), хотя состав и количество микроорганизмов сильно варьируются в зависимости от отдела ЖКТ. Так, желудок характеризуется наименьшей плотностью бактерий, среди которых преобладают Lactobacillus, Streptococcus и Helicobacter pylori. В тонкой кишке обнаруживается до 103-106 КОЕ/мл бактерий, преимущественно Streptococcus и Lactobacillus. Наибольшая плотность комменсальных микроорганизмов наблюдается в толстой кишке (108-109 КОЕ/мл), где преобладают Bacteroides, Clostridium, Fusobacterium и Bifidobacterium. Комменсальные микроорганизмы находятся в динамическом взаимодействии с кишечным эпителием и, таким образом, являются механическим препятствием для инвазии патогенов. Кроме того, они секретируют ряд противомикробных соединений (например, дефензины). Бактерии-комменсалы способны регулировать иммунный ответ слизистых оболочек кишечника и в некоторых случаях подавлять воспалительные, в том числе аллергические, реакции. Нарушение баланса микробиоты возникает в результате длительного или бесконтрольного лечения антибактериальными препаратами, при нарушении моторики ЖКТ (послеоперационный период, прием слабительных препаратов), мальабсорбции (хронический алкоголизм, хронический панкреатит) и при некоторых других состояниях. Дисбактериоз может приводить к развитию заболеваний ЖКТ и других органов. Так, в настоящее время получены данные о его роли в патогенезе болезни Крона, неспецифического язвенного колита и целиакии, а также синдрома хронической усталости и атопического дерматита.
Основным способом диагностики дисбактериоза является микробиологический метод, при котором производят качественную и количественную оценку облигатных, условно-патогенных и патогенных микроорганизмов в кале. На основании результатов исследования делают вывод о дефиците облигатных микроорганизмов или об избыточном росте условно-патогенных или патогенных бактерий. Микробиологическое исследование – это один из наиболее специфических и чувствительных методов исследования, применяемых при диагностике дисбактериоза. Следует, однако, помнить, что бактериологический состав кала (он используется в качестве биоматериала) несколько отличается от бактериологического состава слизистой оболочки кишки. Кроме того, результат теста может зависеть от многих других факторов, таких как недавнее употребление антибактериальных препаратов, продуктов, богатых пробиотиками, или слабительных средств.
С учетом растущей устойчивости условно-патогенных и патогенных микроорганизмов к антибактериальным препаратам все большую роль в терапии дисбактериоза играют альтернативные методы лечения с помощью пробиотиков. Пробиотики – это группа препаратов, содержащих бактерии-комменсалы, или дрожжевые грибы. Считается, что они защищают организм от избыточной условно-патогенной и патогенной микробиоты. Совокупность защитных свойств пробиотиков в отношении какого-либо микроорганизма называется антагонистической активностью и может быть определена с помощью микробиологического исследования. В ходе анализа оценивается антагонистическая активность основных используемых в гастроэнтерологической практике пробиотиков. Определение антагонистической активности пробиотиков проводят перед назначением указанных препаратов для лечения дисбактериоза. Оно может быть дополнено анализом на чувствительность выявленных микроорганизмов к антибиотикам и бактериофагам.
Результат анализа оценивают с учетом дополнительным лабораторных и инструментальных данных.
Для чего используется исследование?
- Для диагностики и лечения дисбактериоза кишечника, контроля его лечения;
- чтобы установить причины кишечных расстройств;
- для подбора рациональной терапии антибиотиками.
Когда назначается исследование?
- При обследовании пациента после длительного курса лечения антибактериальными препаратами;
- при обследовании пациента с указанием на бесконтрольный прием антибактериальных препаратов и слабительных средств в анамнезе;
- при выявлении устойчивости условно-патогенных и патогенных микроорганизмов к антибактериальным препаратам;
- при обследовании пациента с хроническим панкреатитом, хроническим алкоголизмом и другими состояниями, сопровождающимися мальабсорбцией;
- при хронической диарее;
- после долгого лечения антибиотиками, глюкокортикостероидами, иммунодепрессантами, химиотерапевтическими препаратами;
- при аллергических заболеваниях, которые плохо поддаются лечению (например, атопическом дерматите);
- после воздействия химических веществ или ионизирующей радиации – если есть симптомы дисфункции кишечника;
- при длительном периоде выздоровления после острых кишечных инфекций.
Что означают результаты?
Виды микроорганизмов | Возраст, годы | ||
Меньше 1 | 1-60 | Старше 60 | |
Бактероиды | 107– 108 | 109- 1010 | 1010- 1011 |
О дисбактериозе кишечника свидетельствует:
- увеличение количества одного или нескольких видов условно-патогенных микроорганизмов при нормальном количестве бифидобактерий в кишечнике,
- увеличение одного или нескольких видов условно-патогенных микроорганизмов при умеренном снижении количества бифидобактерий (на 1-2 порядка – до 107-108 КОЕ/г),
- снижение содержания представителей облигатной микрофлоры (бифидобактерий и/или лактобацилл) без увеличения количества сапрофитной или условно-патогенной микрофлоры кишечника,
- умеренное или значительное (7 КОЕ/г) снижение количества бифидобактерий в сочетании с выраженным уменьшением количества лактобацилл, появлением изменённых форм кишечной палочки, выявлением одного или нескольких представителей условно-патогенных микроорганизмов в высоких титрах (до 107-108 КОЕ/г).
Что может влиять на результат?
- Антибактериальная терапия или терапия пробиотиками.
Также рекомендуется
- Копрограмма
Кто назначает исследование?
Врач общей практики, гастроэнтеролог, педиатр, инфекционист.
Литература
- Chan BK, Abedon ST, Loc-Carrillo C. Phage cocktails and the future of phage therapy. Future Microbiol. 2013 Jun;8(6):769-83.
- Hütt P, Shchepetova J, Lõivukene K, Kullisaar T, Mikelsaar M. Antagonistic activity of probiotic lactobacilli and bifidobacteria against entero- and uropathogens. J Appl Microbiol. 2006 Jun;100(6):1324-32.
- Robles Alonso V, Guarner F. Linking the gut microbiota to human health. Br J Nutr. 2013 Jan;109 Suppl 2:S21-6. Review.
- Hardy H, Harris J, Lyon E, Beal J, Foey AD. Probiotics, prebiotics and immunomodulation of gut mucosal defences: homeostasis and immunopathology. Nutrients. 2013 May 29;5(6):1869-912.
Источник
ВАЖНО!
Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.
Материал (кал) на кишечный дисбактериоз собирается до начала лечения антибактериальными и химиотерапевтическими препаратами. Для исследования собирают свежевыделенный кал.
За 3 – 4 дня до исследования отменить приём слабительных препаратов, касторового и вазелинового масла и прекратить введение ректальных свечей. Кал, полученный после клизмы, а также после приёма бария (при рентгеновском обследовании) для исследования непригоден.
До сбора анализа помочитесь в унитаз, далее путём естественной дефекации в подкладное судно соберите испражнения (следить, чтобы не попала моча). Подкладное судно предварительно обрабатывается любым дезинфицирующим средством, тщательно промывается проточной водой несколько раз и ополаскивается кипятком.
Кал собирается в чистый, одноразовый контейнер с завинчивающейся крышкой и ложечкой (его можно получить в любом медицинском офисе ИНВИТРО) в количестве не более 1/3 объёма контейнера.
Материал доставляется в лабораторию в течение 3 часов с момента сбора анализа. Желательно в течение указанного времени материал хранить в холоде (для этого можно использовать хладопакет или обложить контейнер кубиками льда, приготовленными заранее).
На контейнере необходимо указать вашу фамилию, инициалы, дату рождения, дату и время сбора материала, запись должна быть сделана разборчивым почерком. В направительном бланке обязательно должен быть указан диагноз и дата начала заболевания, сведения о приёме антибиотиков. При взятии материала необходимо соблюдать стерильность.
По возможности сбор материала на исследование должен осуществляться до назначения антибиотиков (если невозможно, то не ранее, чем через 12 часов после отмены препарата).
Условия, соблюдение которых обязательно:
- не допускается замораживание;
- не допускается длительное хранение (более 5 – 6 часов);
- не пригодны никакие транспортные среды, кроме указанной;
- не допускается неплотно закрытый контейнер;
- не подлежит исследованию биоматериал, собранный накануне.
ВАЖНО!
Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.
Информация проверена экспертом
Лишова Екатерина Александровна
Высшее медицинское образование, опыт работы – 19 лет
Поделитесь этой статьей сейчас
Похожие статьи
Какие анализы важны тем, кто планирует беременность
Планирование беременности один из определяющих факторов рождения здорового ребёнка. Именно поэтому ещё до зачатия малыша женщине целесообразно обследовать свое здоровье в полном объёме. Значительную роль в выявлении возможных отклонений в состоянии будущей мамы играют лабораторные методы исследований.
Железо – жизненно важный микроэлемент
Метаболизм железа меняется при ряде физиологических и патологических состояний – в том числе, активном росте, беременности, различных эндокринных сдвигах, воспалении, инфекционных болезнях.
Подводные камни онкоскрининга
Сегодня многие лаборатории и медицинские центры предлагают услугу онкоскрининга – комплекса исследований, направленных на выявление у человека онкологических заболеваний.
Пролактин (Prolactin)
Пролактин: показания к назначению, правила подготовки к сдаче анализа, расшифровка результатов и показатели нормы.
Латексная аллергия или аллергический «СПИД»
В 1927 году была впервые описана, но осталась фактически незамеченной, аллергическая реакция на латекс. Лишь спустя полвека эта аллергия стала объектом пристального внимания, изучения и практической разработки методов диагностики, профилактики и лечения.
Источник