Микробиология псевдотуберкулеза и кишечного иерсиниоза

Этиология.
Возбудитель — грамотрицательная палочка
— Yersinia pseudotuberculosis. Спор не образует,
имеет капсулу, анаэроб, образует
эндотоксин. При нагревании до 60°С
возбудитель гибнет через 30 мин,
дезинфицирующие средства (2% раствор
хлорамина, растворы лизола, сулемы и
др.) убивают его в течение 1 мин, кипячение
— через 10 с.

Псевдотуберкулезный
микроб имеет соматический 0-антиген и
жгутиковый Н-антиген. В настоящее время
известно 6 сероваров, каждый из них может
вызвать заболевание у человека, однако
чаще встречается 1-й и 3-й серовары.

Эпидемиология.
Источником
инфекции
являются дикие и домашние животные.
Микроб обнаружен у 60 видов млекопитающих
и у 26 видов птиц. Основной резервуар
инфекции — мышевидные грызуны, они
инфицируют продукты литания и воду, в
которых псевдотуберкулезные микробы
легко размножаются. Роль человека как
источника инфекции остается не
доказанной.

Микробы в течение
нескольких месяцев сохраняются в воде,
масле, хлебе, молоке, в почве при
благоприятных условиях — около года.

Заражение
человека происходит через рот (алиментарным
путем) при употреблении инфицированной
пищи (салаты, фрукты, молочные продукты,
вода и др.), не подвергнутой термической
обработке.

Заболевания
псевдотуберкулезом регистрируются в
течение всего года, максимум заболеваемости
приходится на зимне-весенние месяцы
(февраль-март), что принято объяснять
более широким употреблением в пищу
овощей и фруктов, поступающих из
овощехранилищ, где они были инфицированы
грызунами.

Патогенез.
Возбудитель с инфицированной пищей или
водой проникает через рот (фаза
заражения) и, преодолев желудочный
барьер, попадает в тонкий кишечник,
где находит благоприятные условия
для размножения (энтеральная фаза),
следствием чего являются воспалительные
изменения в слизистой оболочке тонкой
кишки. Из кишечника микробы проникают
в регионарные лимфатические узлы и
вызывают лимфаденит (фаза регионарной
инфекции). Затем микробы и их токсины
поступают в кровь, и возникает фаза
генерализации инфекции (бактериемия
и токсемия), она соответствует появлению
клинических общетоксических симптомов
болезни. Дальнейшее прогрессирование
процесса связано с фиксацией возбудителя
клетками ретикулоэндотелиальной
системы, преимущественно в печени и
селезенке. Клинически это проявляется
увеличением печени и нередко селезенки,
нарушением их функций. По-видимому,
таким путем осуществляется элиминация
возбудителя, при этом возможны повторные
генерализации инфекции и возникновение
обострении и рецидивов. В конечном итоге
наступает стойкая фиксация возбудителя
и элиминация его вследствие активации
как клеточных факторов иммунологической
защиты, так и выработки специфических
антител. Наступает клиническое
выздоровление. Продолжительность
иммунитета
точно не установлена, но есть основания
считать его стойким.

Клиника.
Инкубационный период 3-18 дней.

Опорными симптомами
заболевания являются:

Острое начало
Фебрильная
лихорадка (температура в первые же дни
заболевания повышается до 38-40°С)
Выраженный
интоксикационный симптом (общая
слабость, головная боль, бессонница,
плохой аппетит, иногда чувство озноба,
мышечные и суставные боли)
Боли в
животе преимущественно в правой
подвздошной области, расстройство
стула редко. Болезненность и урчание
в правой подвздошной области при
пальпации. Язык покрыт белым налетом,
к 4-5 дню болезни очищается и приобретает
вид “малинового” (ярко-красный с
гипертрофированными сосочками)
Увеличение печени
и селезенки
Мезентериальный
лимфаденит
Одутловатость и
гиперемия лица, шеи (симптом “капюшона”),
что контрастирует с бледным носогубным
треугольником, гиперемия конъюнктив
и инъекция сосудов склер; симптом
«перчаток» (отграниченная розово-синюшная
окраска кистей), симптом «носков»
(отграниченная розово-синюшная
окраска стоп).
Катаральные
явления со стороны верхних дыхательных
путей, гиперемия слизистых ротоглотки.
На коже
туловища у 70-80% больных отмечается сыпь.
Она чаще появляется на 2-4 день болезни.
Чаще локализуется внизу живота, в
подмышечных областях и на боковых
поверхностях туловища. Высыпает
одномоментно, по характеру бывает
точечной, напоминает скарлатинозную,
но может быть и более крупной. По цвету
сыпь бывает от бледно-розовой до
ярко-красной, может располагаться как
на гиперемированном, так и на неизмененном
фоне. Более крупные высыпания
(мелкопятнистая сыпь) располагаются
вокруг суставов, где они образуют
сплошной эритематозный фон. Сыпь
держится не более 3-7 дней. У 1/3 больных
сразу после исчезновения сыпи наступает
пластинчатое шелушение на кистях и
стопах, отрубевидное на спине, груди и
шее.
Артралгический
синдром (гиперемия и припухлость
суставов, ограничение движения в них;
обычно поражаются лучезапястные,
межфаланговые, коленные и голеностопные
суставы.)

Общий
анализ крови:
лейкоцитоз, нейтрофилез с палочкоядерным
сдвигом, моноцитоз, эозинофилия,
увеличенная СОЭ. Красная кровь изменяется
незначительно.

Лабораторная
диагностика.
Материалом для бактериологического
исследования
служат кровь, мокрота, фекалии, моча и
смывы из зева. Посев материала производят
как на обычные питательные среды, так
и на среды обогащения, при этом
используют способность иерсиний хорошо
размножаться при низких температурах
(условия холодильника). Посевы крови и
смывы из зева следует проводить в 1-ю
неделю болезни, посевы фекалий и мочи
— на протяжении всего заболевания.

Из
серологических исследований используют
реакцию агглютинации, РСК, РПГА и
РТГА. Для диагностики используют также
метод иммунофлюоресцении и бактериального
лизиса. При постановке реакции агглютинации
диагностическим считается титр 1:80 и
выше. Более информативной считается
постановка реакции с парными сыворотками.

Лечение.
Больные псевдотуберкулезом должны
соблюдать постельный режим до нормализации
температуры и исчезновения симптомов
интоксикации. Диета рекомендуется
полноценная без существенных ограничений.
Однако при появлении симптомов,
указывающих на поражение желудочно-кишечного
тракта или печени, необходимы
соответствующие ограничения.

Возбудитель часто
устойчив к группе пенициллина и
большинству цефалоспоринов. Предпочтительно
назначение ко-тримоксазола (бисептола)
(по 2 табл. 2 раза в день), тетрациклина
(0,25 4 раза в день), ципрофлоксацина (по
0,25 2 раза в день). При выраженной бактериемии
целесообразна комбинация одного из
вышеперечисленных препаратов с
гентамицином (по 0,08 в/м 2-3 раза в день).
Курс лечения продолжается 7-10 дней.

Поскольку
при псевдотуберкулезе часто возникают
обострения и рецидивы в связи с
недостаточной выработкой иммунитета,
показаны лекарственные препараты,
стимулирующие иммуногенез (метилурацил,
пентоксил, большие дозы аскорбиновой
кислоты, поливитамины).

Для дезинтоксикации
применяют внутривенные вливания,
реополиглюкина, плазмы, альбумина, 10 %
раствора глюкозы, раствора Рингера. В
тяжелых случаях рекомендуются
глюкокортикоиды (преднизолона из расчета
1-2 мг/кг массы тела в сутки в 4 приема в
течение 5-7 дней). Кортикостероиды особенно
показаны при развитии узловатой эритемы
и при полиартритах. В качестве
десенсибилизирующей терапии больные
должны получать антигистаминные
препараты (супрастин, тавегил, димедрол,
дипразин и др.).

Больных выписывают
из стационара на 7-10-й день нормальной
температуры после исчезновения всех
клинических симптомов болезни и
нормализации периферической крови.

Профилактика.
В системе профилактических мероприятий
основное внимание уделяется борьбе с
грызунами, организации правильного
хранения овощей, фруктов и других
продуктов питания, исключающей возможность
их инфицирования. Специфическая
профилактика не разработана.

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]

Источник

Кишечный иерсиниоз и псевдотуберкулез – две самостоятельные, имеющие много общих черт зоонозные инфекции с фекально-оральным механизмом передачи. Клинические проявления этих заболеваний полиморфны и включают симптомы поражения ЖКТ в некоторых случаях со склонностью к генерализации инфекции, развитием экзантемы, в отдельных случаях с последующими поражениями опорнодвигательного аппарата.

Возбудители данных заболеваний относятся к роду Yersinia, сем Enterobacteriaceae. Вид Y.enterocolitica в настоящее время насчитывает 6 биоваров и более 50 серогрупп, из которых 5 наиболее часто вызывают заболевания у человека. Вид Y.pseudotuberculosis включает 21 серотип, объединенный в 5 биоваров.

Эпидемиологической особенностью данных заболеваний является их частая связь с употреблением овощной продукции, хранящейся в овощехранилищах и контаминированной экскрементами грызунов. Описаны случаи крайне тяжелого течения сепсиса, связанные с использованием донорской крови, взятой у доноров с субклинической бактериемией, в которой происходило селективное накопление Y.enterocolitica при хранении образцов крови без замораживания при низких температурах. В редких случаях иерсиниоз может быть вызван другими, т. н. «enterocolitica like» видами иерсиний. Иерсинии часто выявляют у пациентов с симптоматикой острого аппендицита, госпитализированных в хирургические стационары.

Несмотря на существенное снижение заболеваемости псевдотуберкулезом и кишечным иерсиниозом в последние годы, сохраняются территории с эндемично высокими показателями заболеваемости. Кроме того, эти заболевания продолжают представлять значительную проблему для лиц в отдельных изолированных коллективах (воинские части и др.).

Показания к обследованию

Пациенты с ОКИ при наличии эпидемиологических показаний (проживание на эндемичной территории, принадлежность к группе риска);
пациенты с особенностями клинической симптоматики ОКИ (сочетание ОКИ с катаральной симптоматикой, экзантемой, периферической лимфаденопатией, суставным синдромом) при отрицательных результатах выявления более распространенных патогенов.

Материал для исследований

Образцы фекалий – культуральные исследования, выявление АГ, ДНК;
сыворотка крови – обнаружение АТ.

Этиологическая лабораторная диагностика включает выделение чистой культуры с дальнейшей идентификацией возбудителя; обнаружение НК и АГ патогенов, выявление специфических АТ.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Наиболее информативным методом лабораторной диагностики кишечного иерсиниоза и псевдотуберкулеза является культуральный в сочетании с адекватными методами видовой идентификации возбудителя. Обязательным этапом исследования при выявлении Y.enterocolitica является определение вирулентных свойств выделенного изолята. Антигенная характеристика изолята не может служить прямым доказательством наличия у него вирулентных свойств и его этиологической связи с картиной заболевания.

Выявление ДНК патогенов с использованием ПЦР применяется для скрининговой диагностики иерсиниоза и псевдотуберкулеза в острой фазе заболевания. Тест наиболее адаптирован для скрининговых исследований, что связано с его оперативностью и возможностью детектировать нежизнеспособные на фоне антибиотикотерапии формы микроорганизмов. Обязательным требованием к диагностическим тестам данной группы является возможность определять не только видовую принадлежность изолята, но и гены ключевых факторов вирулентности (для Y.еnterocolitica), а также отсутствие перекрестных реакций с близким в филогенетическом плане видом (в случае Y.pseudotuberculosis – Y.рestis).

Для выявления АТ применяют наборы реагентов с использованием ИФА (в РФ мало распространены), а также РА и РНГА. Выявление специфических АТ малоинформативно в первую неделю заболевания, но позволяют уточнять его этиологию в более поздние сроки при отрицательных результатах прямых методов выявления возбудителей.

Показания к применению различных лабораторных исследований. Для применения прямых методов выявления Y.enterocolitica и Y.pseudotuberculosis следует использовать образцы фекалий, забранные у пациента в первые 3–5 дней заболевания до начала антибактериальной терапии. При проведении исследований в очагах групповой заболеваемости или решении других эпидемиологических задач целесообразно применение культурального исследования для изоляции штамма микроорганизма и возможностью его последующей характеристики по ферментативным и антигенным свойствам. Выявление ДНК возбудителей методом ПЦР оправдано при решении задач диагностики, обследовании пациентов на фоне антибиотикотерапии или в качестве скринингового этапа исследования.

Выявление АТ к указанным возбудителям целесообразно при неинформативности результатов прямых методов выявления патогенов. Рекомендовано выполнение исследования в образцах крови, взятых в динамике (конец первой недели и начало третьей недели заболевания). При интерпретации результатов таких исследований следует учитывать наличие у иерсиний АГ, вызывающих перекрестные реакции (возможность ложноположительных результатов).

Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Факт обнаружения Y.enterocolitica или ее ДНК в фекалиях у пациентов с острыми диарейными заболеваниями недостаточен для установления иерсиниозной этиологии заболевания. Лабораторным подтверждением диагноза кишечного иерсиниоза служит выявление штаммов возбудителя, обладающих факторами вирулентности (или их генами). Выявление Y.pseudotuberculosis или ее ДНК методом ПЦР является достаточным для подтверждения диагноза псевдотуберкулеза.

При интерпретации результатов определения специфических АТ минимально учитываемым диагностическим титром при использовании методов РА и РНГА считают 1:160 и 1:200 соответственно. При исследовании в формате «парных сывороток » диагностически значимым считается 2–4-кратное и выше нарастание титра АТ. Следует учитывать возможность ложноположительных результатов в связи с наличием у иерсиний АГ, вызывающих перекрестные реакции.

Источник

№ 11 Возбудители кишечного иерсиниоза. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Лечение.
Кишечный иерсиниоз — острая инфекционная болезнь, характеризующаяся поражением ЖКТ, тенденцией к генерализации с различных органов и систем.
Возбудитель кишечного иерсиниоза Yersiniaenterocolitica.
Таксономия.Y.enterocolitica относится к отделу Gracilicutes, семейству Enterobacteriaceae, роду Yersinia.
Морфологические и тинкториальные свойства. Возбудитель полиморфен: он может иметь форму либо палочки с закругленными концами, либо овоидную с биполярным окрашиванием. Спор не имеет, иногда образует капсулу. Перитрих. Некоторые штаммы имеют пили. Грамотрицателен.
Культуральные свойства.Y.enterocolitica — факультативный анаэроб. Наиб. благоприятная темп. 25С. Возбудитель неприхотлив и растет на простых питательных средах.
Биохимическая активность. Биохимическая активность возбудителя высокая. Внутри вида по спектру б/х активности: индолообразованию, утилизации эскулина, реакции Фогеса – Проскауэра подразделяются на 5 хемоваров.
Основные б/х признаки: расщепление мочевины, ферментация сахарозы, отсутствие ферментации рамнозы, продукция орнитиндекарбоксилазы.
Антигенная структура. О- и Н-антигены, у некоторых штаммов обнаружен К-антиген. По О-антигену различают более 30 серогрупп, из которых от больных чаще всего выделяют представителей серогрупп 03, 09, 05.
Факторы патогенности. Образует термостабильный эндотоксин. Некоторые штаммы выделяют вещество, соответствующее экзотоксину и обладающее энтеро- и цитотоксическим действием. У иерсиний обнаружены также инвазивный белок и белки, препятствующие фагоцитозу. Адгезивная активность иерсиний связана с пилями и белками наружной мембраны.
Резистентность. Чувствителен к высокой температуре, солнечным лучам, дезинфицирующим веществам, но очень устойчив к действию низких температур: хорошо переносит температуру -20 °С.
Эпидемиология. Источники болезни для человека – крысы, мыши, животные и птицы. Механизм заражения иерсиниозом фекально-оральный, основным путем передачи является алиментарный: болезнь может возникнуть при употреблении фруктов, овощей, молока, мяса. Но возможны также контактный (при контакте людей с больными животными) и водный пути передачи.
Патогенез. Возбудитель попадает в организм через рот, в нижних отделах тонкой кишки прикрепляется к эпителию слизистой оболочки, внедряется в клетки эпителия, вызывая воспаление. Под действием токсинов усиливается перистальтика кишечника и возникает диарея. Иногда в патологический процесс вовлекается аппендикс, развивается аппендицит. Незавершенный фагоцитоз способствует генерализации процесса. У людей со сниженным иммунитетом могут развиться сепсис с образованием вторичных гнойных очагов в мозге, печени и селезенке.
Клиника. Различают гастроэнтероколитическую, аппендикулярную и септическую формы. Инкубационный период составляет от 1 до 4 дней. Болезнь начинается остро с повышения температуры тела до 39С, общей интоксикации, рвоты, болей в животе, поноса. Течение продолжительное.
Микробиологическая диагностика. Используют бактериологический и серологический методы исследования. Целью бактериологического метода являются идентификация возбудителя, определение антибиотикограммы, внутривидовая идентификация (установление серовара, биохимического варианта, фаговара). Материалом для бактериологического метода исследования служат испражнения, ликвор, кровь, моча, иногда червеобразный отросток. Материал для исследования помешают в фосфатный буфер и подвергают холодовому обогащению. Серологическая диагностика проводится постановкой РНГА, с диагностическим титром 1:160. Важное диагностическое значение имеет наблюдение за нарастанием титра антител в динамике.
Лечение. Этиотропная антибиотикотерапия.
Возбудитель чумы. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.
Таксономия: Y.pestis вызывает чуму; отдел Gracilicutes, семейство Enterobacteriaceae, род Yersinia. Возбудитель – Yersinia pestis.
Морфологические свойства: грамотрицательные палочки, овоидной формы, окрашиваются биполярно. Подвижны, имеют капсулу, спор не образуют.
Культуральные свойства.
Факультативные анаэробы. Температурный оптимум +25С. Хорошо культивируются на простых питательных средах. Ферментируют большинство углеводов без образования газа. Психофилы – способны менять свой метаболизм в зависимости от температуры и размножаться при низких температурах. Вирулентные штаммы образуют шероховатые (R) колонии, переходные (RS) и сероватые слизистые гладкие авирулентные (S) формы.
Два типа колоний – молодые и зрелые. Молодые с неровными краями. Зрелые колонии крупные, с бурым зернистым центром и неровными краями. На скошенном агаре черед двое суток при +28 С образуют серовато – белый налет, врастающий в среду, на бульоне – нежную поверхностную пленку и хлопковидный осадок.
Биохимические свойства: ферментативная активность высокая: ферментация до кислоты ксилозы, синтез плазмокоагулазы, фибринолизина, гемолизина, лецитиназы, сероводород. Рамнозу, мочевину не ферментирует.
Антигенная структура.
Группа белково-полисахаридных и липополисахаридных антигенов: термостабильный соматический О-антиген и термолабильный капсульный V, W антигены. С W-антигеном связывают вирулентность бактерий. Продуцирует факторы патогенности: фибринолизин, плазмокоагулазу, эндотоксин, экзотоксин, капсулу, V, W антигены.
Резистентность: чувствителен к антибиотикам (особенно стрептомицин), нестоек к окружающей среде при высокой температуре.
Патогенные свойства: Обладает патогенным потенциалом, подавляет функции фагоцитарной системы, подавляет окислительный взрыв в фагоцитах и беспрепятственно в них размножается. Факторы патогенности контролируются плазмидами трех классов. В патогенезе выделяют три основных стадии – лимфогенного заноса, бактериемии, генерализованной септицемии. Имеют адгезины и инвазины, низкомолекулярные протеины (ингибируют бактерицидные факторы), энтеротоксин. Часть факторов контролируется плазмидами вирулентности.
Клинические особенности: Инкубационный период – несколько часов до 8 сут. Различают локальные – кожно-бубонная, бубонная; внешне-диссеминированные – первично-легочная, вторично-легочная и кишечная; генерализованная – первично-септическая, вторично-септическая формы чумы. Региональная лимфоаденопатия, энтероколиты, реактивные артриты, спондилит, лихорадка.
Эпидемиология: Чума – классический природноочаговый зооноз диких животных. Основные носители в природе – сурки, суслики, в городских условиях – крысы. В передаче возбудителя – блохи животных, способные заражать человека.
Иммунитет: клеточно-гуморальный, ограничен по длительности и напряженности.
Микробиологическая диагностика:
Бактериоскопическое исследование. Из исследуемого материала готовят мазки, окрашивают по Граму и водным раствором метиленового синего. Бактерии чумы представляют собой грамотрицательные палочки овоидной формы Бактериологическое исследование.Исследуемый материал засевают на чашки с питательным агаром. Посевы инкубируют при 25С. Первичное изучение посевов производят через 10ч. К этому сроку появляются колонии, которые образованы вирулентными R-формами. Мало- и авирулентные бактерии формируют S-формы колоний. Идентификацию чистой культуры проводят по морфологии бактериальных клеток, характеру роста, антигенным и биохимическим свойствам, чувствительности к специфическому фагу и биопробе.
На бульоне бактерии образуют пленку; ферментируют многие сахара до кислоты, индола не образуют, желатин не разжижают. Содержат групповой термостабильный соматический антиген и специфический термолабильный капсульный антиген.
Биопроба.Проводится для выделения чистой культуры из материала, загрязненного посторонней микрофлорой. Наиболее чувствительными лабораторными животными являются морские свинки, которым материал вводят подкожно. Внутрибрюшинно материал вводят в том случае, если он не загрязнен другими бактериями. После гибели животных отмечают патологические изменения органов и проводят бактериологическое исследование
Экспресс-методы лабораторной диагностики:
1.Иммунофлюоресцентный метод позволяет обнаружить присутствие возбудителя как в патологическом материале, так и в объектах окружающей среды (вода, воздух), а также в пищевых продуктах и эктопаразитах. С этой целью используют люминесцентную видоспецифическую противочумную сыворотку, люминесцентные противокапсульную и противосоматическую сыворотку.
2.РПГА – для обнаружения антигенов бактерий в материале с помощью стандартной противочумной сыворотки, антитела которой нагружены на эритроциты.
Лечение: антибиотики – стрептомицин, препараты тетрациклинового ряда.
Профилактика: специфическая профилактика – живая ослабленная чумная вакцина EV. Имеется сухая таблетированная вакцина для перорального применения. Для оценки иммунитета к чуме (естественного постинфекционного и вакцинального) может применяться внутрикожная аллергическая проба с пестином.
Чумной бактериофаг – при идентификации Y.pestis.
Чумная сухая вакцина – высушенная живая культура Y.pestis вакцинного штамма EV, используется для профилактики чумы.

Читайте также: Амилаз в кишечном соке

Источник