Рнга кишечным диагностикумом что это

Антитела к возбудителю псевдотуберкулёза, Yersinia pseudotuberculosis, РПГА — выявление антител, которые вырабатываются иммунной системой в ответ на инфицирование возбудителем псевдотуберкулёза методом РПГА (реакция пассивной, или непрямой гемагглютинации).

Yersinia pseudotuberculosis — возбудитель псевдотуберкулёза.
Путь передачи — фекально-оральный, то есть посредством заражённой пищи и воды, которые содержат бактерии.

Резервуар инфекции — животные (свиньи, крысы, мыши и другие грызуны, домашние животные и птицы).

Псевдотуберкулёз — острое бактериально-инфекционное заболевание, поражающее, в основном, желудочно-кишечный тракт. К туберкулёзу это заболевание отношения не имеет (исходное название связано с внешним сходством с туберкулёзными бугорками гранулём, выявленных в тканях больных животных).

Длительность инкубационного периода 1—2 дня. Минимальный период — 15 часов, максимальный — 4 дня.

Клиническая картина при иерсиниозе и псевдотуберкулёзе
Основные клинические симптомы заболевания: острое начало, повышение температуры до 38–40 ºС, лихорадка, боли в животе, преимущественно в правой подвздошной области, тошнота, рвота, жидкий стул без патологических примесей, боль в мышцах и суставах, увеличение печени, селезёнки и периферических лимфатических узлов, боли в суставах, у многих больных — сыпь, чаще мелкопятнистая, гиперемия лица, отёчность и гиперемия кистей и стоп. Частым проявлением являются лимфадениты и полиадениты, артралгии, артриты и полиартриты.

Антитела к Yersinia pseudotuberculosis
Выявление специфических антител к возбудителю можно наблюдать к концу первой недели заболевания с быстрым ростом их концентрации на протяжении 2 недель и, в дальнейшем, снижением через 2–6 месяцев. Исследование антител следует проводить в динамике — в парных сыворотках, взятых в начале заболевания и далее через 7–10 дней. Диагностически достоверным серологическим показателем считают 4-кратный (и более) прирост титра антител в РПГА. При отсутствии выраженной динамики титров или необходимости оценки одиночных результатов следует учитывать эпидемиологическую обстановку и сроки болезни, при этом допустимо использовать минимальный условно-диагностический титр 1:100–1:200. При групповых вспышках псевдотуберкулёза, для детей до 5 лет условно диагностический титр может быть снижен до 1:50–1:100.

Показания:

• обследование пациентов с клиникой острой кишечной инфекции;
• для подтверждения клинического диагноза при получении отрицательного результата бактериологического обследования; 
• в целях ретроспективного подтверждения диагноза;
• при позднем обращении больного, назначении антибактериальной терапии.

Подготовка
Кровь рекомендуется сдавать утром, в период с 8 до 11 часов. Взятие крови производится натощак, спустя 4–6 часов голодания. Допускается употребление воды без газа и сахара. Накануне сдачи исследования следует избегать пищевых перегрузок.

Интерпретация результатов
Единицы измерения и коэффициенты пересчёта: тест полуколичественный.

Результат предоставляется в форме «отрицательно» или «положительно». В последнем случае указывается титр антител — последнего разведения сыворотки, дающей положительный результат. 

Диагностически достоверным считают прирост титров в 4 и более раз за 7—10 дней.

Условно-диагностический титр — 1:100.

При групповых вспышках псевдотуберкулёза для детей до 5 лет условно-диагностический титр может быть снижен до 1:50. 

Положительно:

• текущая или перенесённая в прошлом инфекция. Рекомендовано обследовать больного не менее 2 раз — в начале заболевания и с интервалом в 7–10 дней, диагностически достоверным считают 4-кратный и более прирост титров антител. При необходимости оценивать одиночные результаты или отсутствие выраженной динамики титров допустимо использовать минимальный условно-диагностический титр 1:100. При групповых вспышках заболевания для детей до 5 лет условно диагностический титр может быть снижен до 1:50. Результат следует оценивать в комплексе с эпидобстановкой, формой и сроками болезни;
• редко — перекрёстные реакции (другие виды Yersinia, Vibrio, Salmonella, Brucella, Rickettsia). 

Отрицательно: 

• отсутствие инфекции;
• низкая концентрация или отсутствие антител в ранний период инфекции.

Готово к оформлению: 0 анализов

Описание

Исследование представляет собой обнаружение антител к антигенам возбудителей иерсиниоза методом РНГА (реакция непрямой гемагглютинации). Также встречается название РПГА – реакция пассивной гемагглютинации.

Кишечный иерсиниоз представляет собой острое инфекционное заболевание, которое характеризуется преимущественным вовлечением в патологический процесс органов желудочно-кишечного тракта, со склонностью к генерализованному поражению разных органов и систем.

Иерсиниоз чаще всего вызывается микроорганизмом Yersinia Enterocolitica (Y. enterocolitica) – мелкой грамотрицательной палочкой; известно нескольких определенных серотипов – в частности О3, О8, О9. Yersinia Enterocolitica достаточно широко распространены в природе. Они могут обнаруживаться в органах, фекалиях многих разновидностей млекопитающих, птиц, земноводных, а также членистоногих. Их можно найти в почве, пыли и воде, а также на овощах, корнеплодах. Сравнительно частым путем передачи этой инфекции является алиментарный (с загрязненной этими микроорганизмами пищей, молоком, водой). Нужно отметить, что человек источником заражения, как правило, не является. Частота обнаружения иерсиний в кале лиц с диареей, по разным данным, составляет порядка 1-3%.

Было показано, что клинические формы иерсиниоза достаточно разнообразны и до определенной степени обусловлены такими параметрами, как возраст, физическое состояние больного человека. Так, например, у детей старшей возрастной группы и подростков проявления заболевания часто напоминают аппендицит, признаки включают повышение температуры тела и боль в животе. Применительно ко взрослым лицам иерсиниоз сравнительно часто проявляется такими синдромами, как реактивный артрит и узловатая эритема. Вначале отмечается понос с повышением температуры тела, болью в животе, а спустя одну-две недели развивается артрит, затихающий обычно по прошествии 1-4 месяцев. Такой синдром, как узловатая эритема, отмечается главным образом у женщин средней возрастной группы. В грудном возрасте иерсиниоз опасен возможным осложнением в форме сепсиса.

Иными предрасполагающими факторами бактериемии могут являться истощение, иммуносупрессивная терапия, болезни печени, гемохроматоз, передозировка препаратов железа, сахарный диабет.

Более редкие формы заболевания (атипичные проявления обусловлены обычно серотипами, отличающимися от Yersinia Enterocolitica О3, О8 и О9) могут включать ангину на фоне симптоматики со стороны кишечника или без нее, инфекционный эндокардит, воспаление и абсцесс легкого, конъюнктивит, абсцессы мягких тканей, инфекции мочевых путей.

Титр антител возрастает спустя 1 неделю болезни, достигая пика на второй неделе. Рекомендуется проводить обследование больного человека не меньше 2 раз – в частности в начале болезни  и с промежутком в 10-15 дней. В сомнительных случаях рекомендуется выполнять исследование параллельно с РНГА с Y. pseudotuberculosis, демонстрирующими иммунологическую общность с возбудителем Y. enterocolitica. Ценность диагностики методом РНГА снижается по причине потенциально возможных перекрестных реакций (например Salmonella spp., Brucella abortus, Morganella morganii, Rickettsia spp.).

Подготовка

Специальная подготовка не проводится. Сдавать кровь для проведения исследования рекомендуется по прошествии не менее 4 часов после еды.

Показания

Приведены лишь некоторые процессы, состояния и заболевания, при которых целесообразно назначение данного анализа.

РНГА с иерсиниозным диагностикумом может проводиться в комплексе исследований при подозрении на наличие иерсиниоза.

• С целью подтверждения клинического диагноза в случае отрицательного результата бактериологического исследования.

• Для ретроспективного подтверждения диагноза.

• В случае позднего обращения заболевшего лица, назначения антибактериальной терапии.

Интерпретация результатов

Ниже приведены лишь некоторые возможные процессы, состояния и заболевания, при которых отмечаются положительные или отрицательные результаты РНГА с иерсиниозным диагностикумом. Следует помнить, что результат исследования может не всегда являться достаточно специфичным и достаточным критерием для формирования заключения. Представленная информация никоим образом не служит целям самодиагностики и самолечения. Окончательный диагноз устанавливается только врачом при сочетании полученных данных с результатами других методов исследования.

Положительный результат может встречаться при текущей или ранее перенесенной инфекции. Исследование необходимо проводить не менее двух раз – в частности в начале болезни и с промежутком в 10-15 дней; при перекрестных реакциях.

Отрицательный результат может встречаться при отсутствии инфицированности разновидностями иерсиний, в отношении которых производится исследование; при низком содержании, а также отсутствии антител – в частности в ранний период инфекционного процесса.

Реакция непрямой гемолитической агглютинации (РНГА) относится к серологическим методам исследования. Серология – наука об изучении различных свойств плазмы крови. Если точнее говорить, то серология изучает взаимодействие антител, находящихся в организме человека, с определёнными антигенами. В медицинской клинико-лабораторной диагностики серология является одним из разделов иммунологии.

Основными серологическими методами исследования являются различные реакции. Такие реакции, как правило, делятся на прямые и косвенные. В свою очередь прямые бывают двухкомпонентными – это агглютинация, гемолитическая агглютинация или реакция преципитации. А косвенные реакции в основном трехкомпонентные, к ним относятся реакции торможения гемолитической агглютинации и нейтрализации (микроорганизма и вируса).

Агглютинация представляет собой слипание и выпадения в осадок клеток, имеющих определенный антиген, который вступил во взаимодействие с таким же антигеном. Реакция преципитации помогает определить в организме или исследуемом материале неизвестный антиген путем добавления определенного антитела. В результате при положительном результате выпадает осадок в виде хлопьев.

Такие исследования проводят для определения инфекционного или бактериологического заболевания. К сожалению, такие методы не являются однозначными в диагностики данных групп заболеваний. Поэтому при постановке диагнозов следует учитывать анамнез пациента, клинические проявления заболевания, а также назначать дополнительные подтверждающие методы исследования.

Реакция непрямой гемолитической агглютинации (РНГА) – этот метод специфичен для определения инфекционных заболеваний, вызванных бактериями (например, сальмонеллезов или дизентерии), риккетсиями, простейшими или грибами. Также этот метод эффективен в отношении диагностирования сифилиса.

Принцип метода РНГА

При постановке реакции используются эритроциты (может использоваться латекс), которые имеют на своей стенке определенные антигены. К планшету с эритроцитами добавляется исследуемый материал. Если в нем имеются специфические антитела или белки определяемого возбудителя заболевания, то они вступают в связь с антигенами, слипаются и образуют видимый осадок.

Стандартный набор в основном содержит пустой планшет, эритроциты баранов, которые и имеют чувствительность к антигену выявляемого заболевания. Также в наборе присутствуют эритроциты, не имеющие антигенов. Контроли – положительный и отрицательный и стандартный реактив для разведения сывороток.

Самое главное в постановке реакции – это строгое соблюдение всех этапов. Для начала берут пустой планшет для РНГА, в лунки раскапываются последовательно заранее разведенные исследуемые образцы. В первую и последнюю лунки капают контроли. К сывороткам добавляют эритроциты со специфическими антигенами. Инкубируют планшет 2 часа.

Далее описывают визуальный результат. Он учитывается в крестах. Реакция считается верной только тогда, когда контроли прошли реакцию. Соответственно, в лунке с положительным контролем эритроциты располагаются по всему дну в виде хлопьев («зонтик»). В случае с отрицательным контролем на дне лунки выпадает маленькое четкое кольцо из эритроцитов («пуговка»).

Учет результатов

Результат учитывается по интенсивности осадка из эритроцитов в лунке.

• «-» отрицательный результат, как отрицательный контрольный образец, в виде плотного кольца на дне без какой-либо зернистости.
• «+» слабая интенсивность реакции, кольцо на дне в виде «пуговки», но при этом видны отдельные отложения эритроцитов. Результат описывается как «сомнительный». Обязательная пересдачи крови через 2 недели.
• «++» средняя интенсивность прошедшей реакции. Образовавшееся кольцо на дне лунки достаточно широкое с просветом в центре. Результат трактуется как слабо положительный.
• «+++» интенсивная реакция. В лунке эритроциты занимают всю поверхность, выпадают в виде «зонтиков». То есть с тонким кольцом по периферии. Результат оценивается как положительный.
• «++++» резкая интенсивность реакции. Вся лунка равномерно заполнена зернистыми выпадениями эритроцитов, иногда может быть в виде «зонтика». Также результат считается положительным или резко положительным.

Реакция может быть ложноположительной при протекании в организме человека тяжелых аутоиммунных заболеваний. Поэтому, если при пересдаче анализа реакция дает перекрест и результат отчитывается как ложноположительный, незамедлительно нужно обратиться к врачу для выяснения причины данной реакции.

Иногда этот метод принимают для подтверждения другого метода диагностики, основанного также на связывании антиген-антитело, называемого иммуноферментный анализ.

Подготовка к анализу

Чтобы не допустить ложноположительных результатов, к анализу нужно подготовиться заранее. Забор крови на данный анализ производится строго натощак и без употребления утром какой-либо жидкости. Нужно воздержаться от курения, хотя бы за час до сдачи анализа. Алкогольные напитки стоит исключить из рациона как минимум за сутки до анализа. Кровь на РНГА забирается из вены.

В настоящее время реакцию непрямой (пассивной) гемолитической агглютинации очень широко используют в медицинской лабораторной диагностике. Эта методика впервые была протестирована еще в 1965 году. И до сегодняшнего дня очень востребована. Она дает возможность не только определить, протекает ли в данный момент инфекционное заболевание у человека, но и на какой стадии оно находится.

Используют РНГА чаще всего для скрининга населения на наличие инфекционных заболеваний и для подтверждения положительных результатов, например, на сифилис. Основано это на том, что тест считается достаточно чувствительным и эффективным. Но при этом реакция проста в постановке и не требует много времени, результат можно получить уже в день сдачи крови.

Cергеева Екатерина Андреевна