Рнга с кишечным диагностикумом

Реакция непрямой гемолитической агглютинации (РНГА) относится к серологическим методам исследования. Серология – наука об изучении различных свойств плазмы крови. Если точнее говорить, то серология изучает взаимодействие антител, находящихся в организме человека, с определёнными антигенами. В медицинской клинико-лабораторной диагностики серология является одним из разделов иммунологии.

Основными серологическими методами исследования являются различные реакции. Такие реакции, как правило, делятся на прямые и косвенные. В свою очередь прямые бывают двухкомпонентными – это агглютинация, гемолитическая агглютинация или реакция преципитации. А косвенные реакции в основном трехкомпонентные, к ним относятся реакции торможения гемолитической агглютинации и нейтрализации (микроорганизма и вируса).

Агглютинация представляет собой слипание и выпадения в осадок клеток, имеющих определенный антиген, который вступил во взаимодействие с таким же антигеном. Реакция преципитации помогает определить в организме или исследуемом материале неизвестный антиген путем добавления определенного антитела. В результате при положительном результате выпадает осадок в виде хлопьев.

Такие исследования проводят для определения инфекционного или бактериологического заболевания. К сожалению, такие методы не являются однозначными в диагностики данных групп заболеваний. Поэтому при постановке диагнозов следует учитывать анамнез пациента, клинические проявления заболевания, а также назначать дополнительные подтверждающие методы исследования.

Реакция непрямой гемолитической агглютинации (РНГА) – этот метод специфичен для определения инфекционных заболеваний, вызванных бактериями (например, сальмонеллезов или дизентерии), риккетсиями, простейшими или грибами. Также этот метод эффективен в отношении диагностирования сифилиса.

Принцип метода РНГА

При постановке реакции используются эритроциты (может использоваться латекс), которые имеют на своей стенке определенные антигены. К планшету с эритроцитами добавляется исследуемый материал. Если в нем имеются специфические антитела или белки определяемого возбудителя заболевания, то они вступают в связь с антигенами, слипаются и образуют видимый осадок.

Стандартный набор в основном содержит пустой планшет, эритроциты баранов, которые и имеют чувствительность к антигену выявляемого заболевания. Также в наборе присутствуют эритроциты, не имеющие антигенов. Контроли – положительный и отрицательный и стандартный реактив для разведения сывороток.

Самое главное в постановке реакции – это строгое соблюдение всех этапов. Для начала берут пустой планшет для РНГА, в лунки раскапываются последовательно заранее разведенные исследуемые образцы. В первую и последнюю лунки капают контроли. К сывороткам добавляют эритроциты со специфическими антигенами. Инкубируют планшет 2 часа.

Далее описывают визуальный результат. Он учитывается в крестах. Реакция считается верной только тогда, когда контроли прошли реакцию. Соответственно, в лунке с положительным контролем эритроциты располагаются по всему дну в виде хлопьев («зонтик»). В случае с отрицательным контролем на дне лунки выпадает маленькое четкое кольцо из эритроцитов («пуговка»).

Учет результатов

Результат учитывается по интенсивности осадка из эритроцитов в лунке.

• «-» отрицательный результат, как отрицательный контрольный образец, в виде плотного кольца на дне без какой-либо зернистости.
• «+» слабая интенсивность реакции, кольцо на дне в виде «пуговки», но при этом видны отдельные отложения эритроцитов. Результат описывается как «сомнительный». Обязательная пересдачи крови через 2 недели.
• «++» средняя интенсивность прошедшей реакции. Образовавшееся кольцо на дне лунки достаточно широкое с просветом в центре. Результат трактуется как слабо положительный.
• «+++» интенсивная реакция. В лунке эритроциты занимают всю поверхность, выпадают в виде «зонтиков». То есть с тонким кольцом по периферии. Результат оценивается как положительный.
• «++++» резкая интенсивность реакции. Вся лунка равномерно заполнена зернистыми выпадениями эритроцитов, иногда может быть в виде «зонтика». Также результат считается положительным или резко положительным.

Реакция может быть ложноположительной при протекании в организме человека тяжелых аутоиммунных заболеваний. Поэтому, если при пересдаче анализа реакция дает перекрест и результат отчитывается как ложноположительный, незамедлительно нужно обратиться к врачу для выяснения причины данной реакции.

Иногда этот метод принимают для подтверждения другого метода диагностики, основанного также на связывании антиген-антитело, называемого иммуноферментный анализ.

Подготовка к анализу

Чтобы не допустить ложноположительных результатов, к анализу нужно подготовиться заранее. Забор крови на данный анализ производится строго натощак и без употребления утром какой-либо жидкости. Нужно воздержаться от курения, хотя бы за час до сдачи анализа. Алкогольные напитки стоит исключить из рациона как минимум за сутки до анализа. Кровь на РНГА забирается из вены.

В настоящее время реакцию непрямой (пассивной) гемолитической агглютинации очень широко используют в медицинской лабораторной диагностике. Эта методика впервые была протестирована еще в 1965 году. И до сегодняшнего дня очень востребована. Она дает возможность не только определить, протекает ли в данный момент инфекционное заболевание у человека, но и на какой стадии оно находится.

Используют РНГА чаще всего для скрининга населения на наличие инфекционных заболеваний и для подтверждения положительных результатов, например, на сифилис. Основано это на том, что тест считается достаточно чувствительным и эффективным. Но при этом реакция проста в постановке и не требует много времени, результат можно получить уже в день сдачи крови.

Cергеева Екатерина Андреевна

Страничка оказалась полезной? Поделитесь ею в своей любимой соцсети!

Анализ на кишечную группу – это бактериологическое исследование кала на определение патогенных и условно-патогенных микроорганизмов в кишечнике человека. Условно-патогенные бактерии при снижении иммунитета вызывают кишечные инфекции, а патогенные могут вызывать опасные для жизни состояния.

Что позволяет обнаружить анализ?

Анализ позволяет определить наличие в биоматериале пациента до 15 видов бактерий, которые могут быть нормальными, условно-патогенными или патогенными обитателями кишечника. В норме в кишечнике человека насчитывается более 500 видов микроорганизмов.

Баланс микроорганизмов кишечника называют микрофлорой. Бактерии, населяющие кишечник, относятся к одной из трех групп:

• Условно-патогенные микроорганизмы. При нормальном иммунитете не несут вреда, но при каких-либо факторах риска (отравление, снижение иммунитета) начинают размножаться и вызывают инфекционные процессы в организме. К условно-патогенным микроорганизмам относят все семейство энтеробактерий (см. таблицу ниже).
• Патогенные микроорганизмы. Это группа бактерий, опасных для здоровья человека. Они могут вызывать острые кишечные инфекции, вплоть до обезвоживания организма. К ним относят такие бактерии, как сальмонеллы, шигеллы, холерный вибрион. В норме этих микроорганизмов в микрофлоре кишечника не содержится. Попадая в организм, патогенные бактерии начинают интенсивно размножаться, вытесняя нормальную флору и выделяя токсины в кровоток. Данное состояние требует немедленной госпитализации в инфекционное отделение.
• Нормальные микроорганизмы. Основной функцией нормальной флоры кишечника является защита организма от заселения чужеродными бактериями. Бифидобактерии и лактобактерии выделяют кислоты (молочную и уксусную), которые разрушают оболочку вредоносных микроорганизмов. Помимо защиты, нормальная флора поддерживает и стимулирует иммунитет, выводит токсины из кишечника. «Хорошие» бактерии регулируют газовый и водно-солевой состав, производят некоторые витамины. Составляют нормальную флору лакто- и бифидобактерии, кишечная палочка, кокки.

Таблица 1. Представители 3 групп микроорганизмов кишечника.

Для того чтобы определить количество тех или иных представителей микрофлоры кал засевается на специализированные питательные среды, то есть создаются благоприятные условия для жизнедеятельности микроорганизмов. Для каждого вида бактерий существуют индивидуальные питательные среды. Сначала бактерии подращивают в жидких средах или бульонах, затем их переносят в твёрдые питательные среды для дифференцировки видов. Для точного определения рода и вида микроорганизмов ставят дополнительные биохимические тесты и проделывают микроскопию.

Как правильно сдавать анализ?

Для точности исследования пациенту нужно прибегнуть к некоторым рекомендациям. От этого напрямую будет зависеть результат и информативность исследования.

Подготовка к сдаче анализа

1. За неделю до забора материала отказаться от антибактериальной терапии и слабительных средств. При приёме данных групп лекарственных средств нарушается микрофлора кишечника, что приводит к неверным результатам исследования.
2. За 3-5 дней до анализа отказаться от приёма продуктов, которые вызывают брожение. Также желательно исключить алкоголь.
3. Отказаться от введения ректальных свечей.

Подготовка тары

Для забора кала требуется специальная стерильная ёмкость. Контейнер для сбора материала можно приобрести в любой аптеке. Если возможности приобрести такой контейнер нет, то можно воспользоваться обычной стеклянной баночкой. Её нужно хорошо помыть, а затем прокипятить.

Сбор материала

1. Материалом для исследования служит кал, после естественной дефекации.
2. Биоматериал собирается с чистой поверхности (для избежания обсемененности посторонними микроорганизмами).
3. Забор кала производится из средней части биоматериала.
4. Объем кала должен быть не менее 20 грамм (3 мерные ложки).
5. Если материал на своей поверхности содержит гной, кровь, слизь, то следует взять на исследование именно этот участок.
6. Забор материала рекомендуется производить с утра.

Как и сколько можно хранить материал?

Для более точного результата кал следует доставить в лабораторию не позднее чем через два часа после забора. Если таковой возможности нет, то в холодильнике проба может храниться не более 4 часов.

Расшифровка показателей

Интерпретирует результаты исследований только лечащий врач. Результаты представлены на специализированном бланке по форме лечебного учреждения. Количественное содержание микроорганизмов микрофлоры учитывается в степенях. Нормы у детей и взрослых отличаются.

Принципы терапии

При нарушении баланса микрофлоры кишечника терапия назначается комплексная. Также важно знать причину этого нарушения. Если в результатах анализа превалирует условно-патогенная флора, то схема лечения выглядит следующим образом:

• Антибиотики, но только при установлении точного возбудителя. Также назначается дополнительное исследование чувствительности пациента к антибактериальным препаратам.
• Пребиотики. Применение препаратов, с помощью которых происходи заселение лакто- и бифидобактерий.
• Пробиотики. В их составе живые формы полезных микроорганизмов.
• Иммуномодуляторы и витаминотерапия. Для поднятия и поддержания иммунных сил организма.

Если же в анализе устанавливается патогенная флора, то пациент немедленно госпитализируется в инфекционное отделение и проходит лечение там. Также исследуются все лица, контактирующие с ним в период заболевания.

Кому назначается исследование?

Анализ на исследование кишечной группы назначается при:

• длительных расстройствах пищеварительного тракта;
• периодических или длительных запорах;
• длительном лечении антибактериальными препаратами;
• сильных аллергических реакциях, не поддающихся терапевтической коррекции;
• реабилитации пациентов после перенесения тяжёлых кишечных инфекций или подозрений на них.

Уважаемые пациенты! Каталог анализов в настоящее время находится в стадии наполнения информацией и содержит в себе далеко не все выполняемые нашим центром исследования. Филиалами Центра эндокринологии проводится более 700 видов лабораторных анализов. С их полным списком Вы можете ознакомиться здесь.

Пожалуйста, уточняйте информацию о стоимости услуг и подготовке к анализам по телефонам (812) 344-0-344, +7 953 360 96 11. При сдаче анализов крови, пожалуйста, учитывайте стоимость забора биоматериала.

Готово к оформлению: 0 анализов

Исследование представляет собой обнаружение антител к антигенам возбудителей иерсиниоза методом РНГА (реакция непрямой гемагглютинации). Также встречается название РПГА – реакция пассивной гемагглютинации.

Кишечный иерсиниоз представляет собой острое инфекционное заболевание, которое характеризуется преимущественным вовлечением в патологический процесс органов желудочно-кишечного тракта, со склонностью к генерализованному поражению разных органов и систем.

Иерсиниоз чаще всего вызывается микроорганизмом Yersinia Enterocolitica (Y. enterocolitica) – мелкой грамотрицательной палочкой; известно нескольких определенных серотипов – в частности О3, О8, О9. Yersinia Enterocolitica достаточно широко распространены в природе. Они могут обнаруживаться в органах, фекалиях многих разновидностей млекопитающих, птиц, земноводных, а также членистоногих. Их можно найти в почве, пыли и воде, а также на овощах, корнеплодах. Сравнительно частым путем передачи этой инфекции является алиментарный (с загрязненной этими микроорганизмами пищей, молоком, водой). Нужно отметить, что человек источником заражения, как правило, не является. Частота обнаружения иерсиний в кале лиц с диареей, по разным данным, составляет порядка 1-3%.

Было показано, что клинические формы иерсиниоза достаточно разнообразны и до определенной степени обусловлены такими параметрами, как возраст, физическое состояние больного человека. Так, например, у детей старшей возрастной группы и подростков проявления заболевания часто напоминают аппендицит, признаки включают повышение температуры тела и боль в животе. Применительно ко взрослым лицам иерсиниоз сравнительно часто проявляется такими синдромами, как реактивный артрит и узловатая эритема. Вначале отмечается понос с повышением температуры тела, болью в животе, а спустя одну-две недели развивается артрит, затихающий обычно по прошествии 1-4 месяцев. Такой синдром, как узловатая эритема, отмечается главным образом у женщин средней возрастной группы. В грудном возрасте иерсиниоз опасен возможным осложнением в форме сепсиса.

Иными предрасполагающими факторами бактериемии могут являться истощение, иммуносупрессивная терапия, болезни печени, гемохроматоз, передозировка препаратов железа, сахарный диабет.

Более редкие формы заболевания (атипичные проявления обусловлены обычно серотипами, отличающимися от Yersinia Enterocolitica О3, О8 и О9) могут включать ангину на фоне симптоматики со стороны кишечника или без нее, инфекционный эндокардит, воспаление и абсцесс легкого, конъюнктивит, абсцессы мягких тканей, инфекции мочевых путей.

Титр антител возрастает спустя 1 неделю болезни, достигая пика на второй неделе. Рекомендуется проводить обследование больного человека не меньше 2 раз – в частности в начале болезни и с промежутком в 10-15 дней. В сомнительных случаях рекомендуется выполнять исследование параллельно с РНГА с Y. pseudotuberculosis, демонстрирующими иммунологическую общность с возбудителем Y. enterocolitica. Ценность диагностики методом РНГА снижается по причине потенциально возможных перекрестных реакций (например Salmonella spp., Brucella abortus, Morganella morganii, Rickettsia spp.).

Специальная подготовка не проводится. Сдавать кровь для проведения исследования рекомендуется по прошествии не менее 4 часов после еды.

Приведены лишь некоторые процессы, состояния и заболевания, при которых целесообразно назначение данного анализа.

РНГА с иерсиниозным диагностикумом может проводиться в комплексе исследований при подозрении на наличие иерсиниоза.

С целью подтверждения клинического диагноза в случае отрицательного результата бактериологического исследования.

Для ретроспективного подтверждения диагноза.

В случае позднего обращения заболевшего лица, назначения антибактериальной терапии.

Ниже приведены лишь некоторые возможные процессы, состояния и заболевания, при которых отмечаются положительные или отрицательные результаты РНГА с иерсиниозным диагностикумом. Следует помнить, что результат исследования может не всегда являться достаточно специфичным и достаточным критерием для формирования заключения. Представленная информация никоим образом не служит целям самодиагностики и самолечения. Окончательный диагноз устанавливается только врачом при сочетании полученных данных с результатами других методов исследования.

Положительный результат может встречаться при текущей или ранее перенесенной инфекции. Исследование необходимо проводить не менее двух раз – в частности в начале болезни и с промежутком в 10-15 дней; при перекрестных реакциях.

Отрицательный результат может встречаться при отсутствии инфицированности разновидностями иерсиний, в отношении которых производится исследование; при низком содержании, а также отсутствии антител – в частности в ранний период инфекционного процесса.

No related posts.