Рост кишечной палочки на среде левина
ЛЕВИНА СРЕДА (M. Levine, амер. бактериолог, род. в 1889 г.; син. агар с эозином и метиленовым синим) — цветная элективная питательная среда для дифференцирования бактерий сем. Enterobacteriaсеае, используется при лабораторной диагностике дизентерии, брюшного тифа, сальмонеллезов и других кишечных инфекций. Впервые агар с эозином и метиленовым синим был предложен в 1916 г. Холт-Харрисом и Тигом (J. E. Holt-Harris, О. Teague), позднее, в 1918 г., состав среды был модифицирован Левином.
Л. с. наряду с другими твердыми цветными дифференциально-диагностическими питательными средами для энтеробактерий нашла широкое применение в лаб. практике. С ее помощью удается в сравнительно большом проценте случаев обнаружить патогенную лактозонегативную микрофлору. Готовая Л. с. довольно стабильна, не изменяет своих свойств на свету или при хранении на протяжении нескольких дней; при ее изготовлении не требуется точного установления концентрации водородных ионов (pH). Входящие в состав Л. с. органические красители избирательно задерживают рост грамположительных бактерий, благодаря чему она одновременно является средой обогащения и дает относительно лучшие результаты при непосредственном посеве исследуемого материала, даже если он содержит сравнительно малое количество патогенных бактерий.
В зависимости от качества отдельных ингредиентов (пептона и в особенности красителей) получаемые на Л. с. результаты могут несколько варьировать, поэтому при изготовлении каждой новой серии среды желательно использование материалов одной и той же марки, что значительно облегчает распознавание колоний.
Известно несколько прописей и способов приготовления Л. с. (Ю. А. Козлов, Г. Я. Синай, О. Г. Биргер и др.). Наибольшее распространение получил способ, при к-ром раздельно готовят основную среду, р-ры лактозы и красителей, пригодные для сохранения впрок и смешиваемые перед употреблением.
Основная среда состоит из 10 г бактериологического пептона, 15 г агар-агара, 2 г фосфата калия двузамещенного (K2HPO4) и 1 л дистиллированной воды. Ее стерилизуют в автоклаве при 1 ат 15—20 мин., pH не исправляют.
При приготовлении дифференциальной среды на каждые 100 мл расплавленной основной среды при постоянном помешивании добавляют приготовленные на дистиллированной воде и предварительно простерилизованные текучим паром (дробно, 3 дня подряд по 15—20 мин.) следующие р-ры в приведенной последовательности 5 мл 20% р-ра медицинской лактозы, 2 мл 2% р-ра эозина щелочного (бактериологического), 1,5 мл 0,5% р-ра метиленового синего. Готовую среду разливают в чашки Петри, слегка подсушивают и используют как обычно. Цвет среды сине-фиолетовый.
Колонии кишечной палочки на Л. с. небольшие, округлые, с гладкой блестящей поверхностью, темно-синего (до черного) цвета, иногда с металлическим блеском. Молодые колонии мутноватые, непрозрачные, могут быть окрашены только в центре. Колонии возбудителей дизентерии, брюшного тифа и паратифов относительно более мелкие, круглые, блестящие и прозрачные, обычно совершенно бесцветные (молодые) или с легким розоватым или голубоватым оттенком. Колонии протея ползучего роста не дают; они небольшие, изолированные, оранжево-желтого цвета. Среда меняет свой цвет только вокруг колоний протея.
Некоторые авторы рекомендуют увеличивать количество 0,5% р-ра метиленового синего до 2 мл на 100 мл основной среды или исключать из ее состава фосфатный буфер. Можно готовить среду не с пептоном, а на основе перевара Хоттингера, при pH 7,2—7,3 с добавлением соответствующего прописи количества агара и фосфорнокислого калия. Применение мясной воды для приготовления среды недопустимо, дифференциация колоний в этом случае значительно ухудшается.
Известен способ приготовления сухой Л. с., очень стабильной по качеству и особенно удобной для длительного хранения и в условиях экспедиционной работы (Н. В. Плоскирев).
Стабильная сухая Л. с. выпускается промышленностью, инструкция по ее изготовлению и применению рассылается вместе со средой. Большинство диагностических лабораторий применяет для выделения и дифференцирования патогенных энтеробактерий высококачественные стандартные элективные сухие питательные среды отечественного производства — Л. с., бактоагар Ж, среду Плоскирева (см. Плоскирева среда).
См. также Дифференциально-диагностические среды, Питательные среды.
Библиография: Руководство по микробиологической диагностике инфекционных болезней, под ред. К. И. Матвеева, с. 110, М., 1973; Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования, под ред. М. О. Биргера, с. 58, М., 1973; Levine М. The effect of concentration of dyes on differentiation of enteric bacteria on eosin- methylene- blue agar, J. Bact., v. 45, p. 471, 1943.
Г. П. Беликов.
Источник: Большая Медицинская Энциклопедия (БМЭ), под редакцией Петровского Б.В., 3-е издание
Рекомендуемые статьи
Источник
Кишечная палочка: микробиология, строение и свойства
К бактериями кишечных палочек относятся:
- Эшерихия;
- Цитробактер;
- Энтеробактер;
Морфология и тинкториальные свойства кишечной палочки. Эшерихия обитает в толстой кишке человека и имеет форму палочки с закругленными краями. Если ее находят в окружающей среде, значит, местность загрязнена.
Этот микроорганизм имеет размер один микрометр и небольшие жгутики. Анаэробен и граммотрицателен. Растет в слегка кислой среде (ph 7,5) при температуре 37 градусов Цельсия. Ферментирует углеводы с высвобождением газа и кислоты.
Образует индол и сероводород.
Эшерихии синтезируют следующие токсины:
- Эндотоксин, стабильный при воздействии внешних факторов.
- Экзотоксин, который легко распадается при попадании в кислородную среду.
Биохимические и культуральные свойства кишечной палочки. Не воздействуют на желатин, свертывают молочные продукты, обладают высокой ферментативный активностью при воздействии на углеводы. По способности расщеплять лактозу выделяют лактозоположительные и отрицательные палочки. На среде из агара быстро образуют зерна бело-голубого цвета.
Устойчивость. Хорошо сохраняют свою жизнедеятельность при воздействии внешних факторов. Начинают погибать только при температуре 60 градусов Цельсия. Уничтожить их могут разные химические растворы (например, карбоновая кислота, хлорамин).
Структура антигенов
- Внутриклеточный О-антиген (имеют липополисахариднопротеиновый состав).
- Расположенный на капсуле, поверхностный К-антиген (полисахариды, бывают термолабильными и термостабильными).
- О-антиген, располагающийся на жгутиках (термолабильный протеин).
При мутации этих антигенов могут появляться новые штаммы E.coli. Некоторые из них не патогенны и даже могут быть полезны для организма. Другие обладают неблагоприятным действием, например, вызывая диарею. Третьи могут вызывать гибель, особенно в детском возрасте.
Ферментативный состав эшерихий. Главный фермент этих бактерий – колицин. Колицин уничтожает родственные бактерии вида E.coli и дизентерий. Если клетка выделяет этот фермент, она называется колициноген. Так как бывают различные группы колицина, можно дифференцировать определенный штамм E.coli. Это позволяет поставить точный диагноз и подобрать лечение.
Значение E.coliдля нормальной микрофлоры кишечника. Заселяют этот орган в первые дни после рождения человека.
Усиленно размножаясь, продвигаются по стенке кишечника и становятся главными анаэробами.
Так как эшерихия является основным компонентом нормальной микрофлоры кишечника, ее используют при изготовлении препаратов, нормализующих его состав.
Патогенные серовары кишечной палочки. Выходя за пределы кишечника, эти бактерии становятся патогенными. Попадая в брюшную полость, вызывают перитонит, во влагалище – кольпит, в предстательной железе – простатит. Все эти состояния лечатся с применением антибактериальным препаратов. Стоит не забывать, что бактерии могут приобрести устойчивость к этим лекарственным средствам.
Существует огромное количество вирулентных форм кишечных палочек (около 150 видов). По патогенности их делят на:
- Энтеропатогенные (энтероколит новорожденных);
- Энтеротоксигенные (холероподобные заболевания);
- Энтероинвазивные (дизентерия);
- Энтерогеммолитические (заболевания, передающиеся человеку от крупного рогатого скота).
Пути заражения вирулентным штаммом E.coli.
- Алиментарный;
- Фекально-оральный.
Патогенная кишечная палочка может вызвать воспалительные заболевания желудочно-кишечного тракта (гастроэнтерит, язвенной колит), мочеполовой системы, центральной нервной системы (менингит), легочной системы (пневмония).
Часто причиной заражения могут быть немытые овощи и фрукты, сырое мясо.
Эширихиозы – это заболевания желудочно-кишечного тракта, вызванные диареегенным сероваром кишечной палочки. Морфологически эти виды одинаковы, хорошо растут на питательных средах, имеют устойчивость к внешним воздействиям. Резервуаром болезни является человек.
Микробиологическая (лабораторная) диагностика эшехириозов
- Анализируемый материал: кровь, кал, моча, ликвор, выделения гноя, рвотные массы, слизь из носа и зева.
- Биохимические показатели не определяют, так как они показывают только родовую принадлежность. Исследуют только патогенные свойства эшерихий.
- Сначала изготавливают мазки для просмотра их под микроскопом. Далее делают посев на питательную среду.
- Проводят оксидазный тест и пробную реакцию агглютинации с поливалентными сыворотками. Это делается для того, чтобы определить группу антигена кишечной палочки.
- Используемые питательные среды: Левина, Ресселя.
Для лечения заболеваний, вызванных E.
coli, используют аутовакцины, бактериофаги, антибактериальные средства (Стрептоцид, Сульфаниламиды, Хлортетрациклин и другие препараты).
data-matched-content-rows-num=”3″ data-matched-content-columns-num=”3″
Источник: https://www.zoonoz.ru/stroenie-kishechnoj-palochki.php
Агар Левина
| EMB Agar (Levine) Агар Левина | М022 |
| Agar BaseОснова агара Левина | М301 |
Эту среду рекомендуют для выделения, подсчета и дифференциации грамотрицательных микроорганизмов кишечной группы.
EMB Agar, Levine (M022)Рост Escherichia coli
Состав**:
| Ингредиенты | М022 грамм/литр | М301 грамм/литр |
| Пептический перевар животной ткани | 10,00 | 10,00 |
| Калия гидрофосфат | 2,00 | 2,00 |
| Лактоза | 10,00 | – |
| Эозин Y | 0,40 | 0,40 |
| Метиленовый синий | 0,065 | 0,065 |
| Агар-агар | 15,00 | 15,00 |
| Конечное значение рН (при 25°С) | 7,1 ± 0,2 | 7,3 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 37,5 г порошка М022 или 27,5 г порошка М301 в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Добавить соответствующий углевод к Основе агара Левина (М301) перед стерилизацией.
Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. НЕ ДОПУСКАТЬ ПЕРЕГРЕВАНИЯ СРЕДЫ. Остудить до 50°С и встряхнуть для окисления метиленового синего (чтобы восстановить его синий цвет и размешать хлопьевидный преципитат).
Если среда используется в тот же день, ее можно не автоклавировать.
Предупреждение: среду надо хранить в темноте, чтобы не допустить ее окисления на свету.
Принцип и оценка результата:
Эта среда разработана Levine (1, 2) и используется для дифференциации Escherichia coli и Enterobacter aerogenes, а также для быстрой идентификации грибов Candida albicans. Американские специалисты рекомендуют эту среду для выделения, подсчета и дифференциации грамотрицательных микроорганизмов кишечной (колиформной) группы (3, 4, 5).
Метиленовый синий и эозин в определенной степени подавляют рост грамположительных микроорганизмов. Данные красители служат в качестве дифференцирующими индикаторами ферментации лактозы. На этой среде могут вырастать в виде точечных колоний дрожжи и некоторые грамположительные бактерии, например, энтерококки.
Weld (6, 7) предложил использовать агар Левина с добавлением хлортетрациклина гидрохлорида для быстрой идентификации грибов Candida albicans в клиническом материале.
Обнаружение этих грибов в таком материале, как фекалии, оральный и вагинальный секрет, ногти, чешуйки кожи и другом возможно через 24-48 ч инкубирования при 35-37°С в атмосфере, содержащей 10% углекислого газа. Однако культуральные свойства грибов при этом варьируют.
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий светло-лиловый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет красновато-лиловую окраску, опалесцирует с зеленоватым оттенком и легким преципитатом, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор М022 (3,75% вес/об) имеет рН 7,1 ± 0,2, водный раствор М301 (2,75% вес/об) имеет рН 7,3 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 ч при 35-37°С.
| Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост | Цвет колоний на среде М317 |
| Escherichia coli (25922) | Обильный | Черно-синие с металлическим блеском |
| Pseudomonas aeruginosa (27853) | Обильный | Бесцветные |
| Salmonella typhimurium (14028) | Обильный | Бесцветные |
| *Candida albicans (10231) | Хороший или обильный | Бесцветные |
| Enterobacter aerogenes (13048) | Хороший | Розовые или красные |
| Staphylococcus aureus (25923) | Слабый или отсутствует | Бесцветные |
| Saccharomyces cerevisiae (9763) | Слабый или отсутствует | Кремовые |
| Enterococcus faecalis (29212) | Подавляется | – |
Примечание: “*” в атмосфере с 10% углекислого газа;
Ссылки:
1. Levine M., 1918, J. Infect. Dis., 23:43. 2. Levine M., 1921, Bull. 62, Iowa State College Engr. Exp. Station. 3. Greenberg A. E., Trussell R. R. and Clesceri L. S. (Eds.), 1985, Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 16th ed., APHA, Washington, D.C. 4. Marshall R. (Ed.
), 1992, ‘Standard Methods for the Examination of Dairy Products, 16th ed., APHA Inc., New York. 5. Speck M. (Ed.), 1992, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 3rd ed., APHA, Washington, D.C. 6. Weld J. T., 1952, Arch. Dermat. Syph., 66:691.
7. Weld J. T., 1953, Arch. Dermat. Syph.
, 67(5):433.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С в темноте.
Источник: https://www.himedialabs.ru/m022-m301
Левина среда – Ваш Недуг
Среда Левина (агар с эозином и метиленовым синим) [c.363]
Разложение солей арилдназоння. Закись меди (П, 230— 231)—лучший катализатор гомолитического разложения солеи арилдиазония [2]. Однако ее недостаток в том, что она эффективна только в кислой среде.
Левин и Михль [3] исследовали эффективность различных комплексов перхлората меди(1) с гетероциклическими аминами. Из всех солей меди(1) М. обладает наивысшей эффективностью в нейтральной среде. В этой среде эффективен также медь(1)-трмс-(2-пиколин)перхлорат [4]. [c.
320]
Полученный из осадка раствор засевают на плотные электив-, ные питательные среды соответственно предполагаемому виду микроба, а именно висмут-сульфит агар для обнаружения бактерии брюшного тифа и паратифа В Эндо — для бактерий паратифа А бакто-агар Плоскирева или среду Левина — для бактерий дизентерии.
Жидкость, внесенную на поверхность каждой питательной среды в количестве 0,25 мл, равномерно распределяют в чашке стерильным шпаделем. ПосЛе посева чашки помещают в термостат. Для испарения жвдкости крышки чашек временно снимают и покрывают их кружками стерильной бумаги. Подсушенные чашки в дальнейшем закрывают крышками и оставляют.
а термостате дном кверху. [c.150]
Антиген для постановки реакции агглютинации получают следующим образом пробу воды, в зависимости от задачи исследования, засевают на-плотные элективные питательные среды— фуксин-сульфитный агар, однос харный розоловый агар, бактоагар Плоскирева или среду Левина. [c.156]
Наряду с перечисленными сухими средами в лаборатории должны быть сухой агар, с эозин-метиленовой синей (среда Левина), сухой вйсмут-сульфит агар, сухой бактоагар Плоскирева и сухие препараты с индикатором ВР и углеводами (среды Гисса). Каждая из этих сред снабжена этикеткой, где указан рецепт, по которому их готовят. [c.187]
Среда Левина. Выпускается.в виде порошка и состоит из высушенного питательного агара с лактозой, К2НРО4, метиленовым синим и эозином. Готовится так же, как и среда Эндо. Среда темно-фиолетового цвета. Лактоположитель-ные бактерии образуют колонии насыщенного синего цвета, лактозоотрицательные — бесцветные колонии. [c.46]
Второй день. 1. Просматривают посевы, сделанные накануне. Колонии энтеропатогенных кишечных палочек не отличаются от колоний условно патогенных кишечных палочек.
На чашках со средой Эндо они имеют круглую форму, ровный, четко очерченный край, матовую поверхность, малиново-красный цвет, который зависит от способности бактерий расщеплять лактозу с образованием кислоты, но без металлического блеска.
На среде Левина колонии кишечной палочки темно-синего цвета, в остальном они не отличаются от колоний кишечной палочки на среде Эндо. На среде Аселя—Либерманна колонии энтеропатогенных кишечных палочек имеют розовый цвет, на среде Плоскирева они подобцы колониям дизентерийных бактерий. [c.206]
Первичный посев и выделение сальмонелл из дуоденаль” ного содержимого. Желчь, полученную для бактериологического исследования, засевают а) на плотные питательные среды Плоскирева (рец.
81), висмут-сульфитный агар (рец. 82), среду Левина (рец. 80) и Эндо (рец. 79) б) во флаконы с бульоном так, чтобы соотношение между исследуемым материалом и питательной средой составляло 1 10. [c.
213]
Среда Плоскирева имеет перед средами Левина и Эндо два преимущества.
Во-первых, она в значительно большей степени, чем другие среды, подавляет размножение сапрофитов, обусловливая тем самым возможность увеличивать количество высеваемого на нее материала во-вторых, обладает антифаговым свойством, что обеспечивает более высокую частоту высеваемости возбудителей дизентерии. Однако наряду с отмеченными положительными качествами среда Плоскирева в отдельных случаях угнетает рост дизентерийных мик- [c.230]
На- средах Левина, Плоскирева бактерии дизентерии образуют бесцветные прозрачные колонии круглой формы, слегка приподнятые над поверхностью питательной среды, с глянцевой поверхностью и ровным краем.
Бактерии дизентерии Зонне часто растут в К-форме, образуя плоские, распластанные по поверхности питательной среды колонии с зазубренными краями.
При отсутствии на плотных питательных средах характерного для дизентерийных бактерий роста производят высев на эти же питательные среды с селенитовой среды обогащения. [c.231]
Для выявления патогенных бактерий кишечной группы содержащийся на тампоне материал тщательно втирают в по-вв рх1Н0сть плотных питательных сред Левина, Вильсона— Блер, Плоскирева. После произведенного посева тампон, снятый с палочки, и оставшуюся в пробирке жидкость — смыв засевают в среду обогащения (10% желтаый бульон). [c.334]
Смотреть страницы где упоминается термин Среда Левина: [c.320] [c.241] [c.604] [c.330] Смотреть главы в:
Микроорганизмы и самоочищение почвы -> Среда Левина
Микробиология с техникой микробиологических исследований изд.4 -> Среда Левина
Левинит
© 2019 chem21.info Реклама на сайте
Источник: //www.chem21.info/info/1668407/
Агар Левина
EMB Agar (Levine) | М022 |
| Agar Base Основа агара Левина | М301 |
Эту среду рекомендуют для выделения, подсчета и дифференциации грамотрицательных микроорганизмов кишечной группы.
EMB Agar, Levine (M022)
Рост Escherichia coli
Источник
Оглавление темы “Эшерихии. Эшерихиозы. Кишечная палочка. Шигеллы. Дизентерия.”:
1. Диагностика энтеробактерий. Выявление энтеробактерий. Диагностические подходы для энтеробактерий.
2. Эшерихии. Эшерихиозы. Свойства эшерихий. Кишечная палочка. Escherichia coli. Морфология кишечной палочки. Культуральные свойства кишечной палочки.
3. Биохимические свойства кишечной палочки. Антигены кишечной палочки. Антигенная структура кишечной палочки. Серовары кишечной палочки.
4. Патогенез поражений кишечной палочкой. Клинические проявления коли инфекции. Кишечные инфекции ( коли-инфекции ). Энтеротоксигенные кишечные палочки.
5. Энтероинвазивные кишечные палочки. Энтеропатогенные эшерихии. Энтерогеморрагические кишечные палочки.
6. Энтероадгезивные кишечные палочки. Уропатогенные эшерихии. Инфекции мочевыводящих путей вызванные кишечной палочкой. Бактериемия эшерихий.
7. Менингит вызванный кишечной палочкой. Респираторные инфекции вызванные эшерихиями ( кишечной палочкой ).
8. Микробиологическая диагностика кишечной палочки. Диагностика кишечной палочки. Выявление эшерихий.
9. Лечение эшерихиозов. Лечение кишечной инфекции. Профилактика эшерихиозов. Профилактика кишечной инфекции.
10. Шигеллы. Дизентерия. Бактериальная дизентерия. Шигеллез. История дизентерии. Серовары шигелл. Серовары возбудителей дизентерии.
Эшерихии. Эшерихиозы. Свойства эшерихий. Кишечная палочка. Escherichia coli. Морфология кишечной палочки. Культуральные свойства кишечной палочки.
Своё название бактерии получили в честь немецкого педиатра Т. Эшериха, впервые выделившего Escherichia coli из содержимого кишечника детей. Род образуют подвижные (перитрихи) прямые палочковидные бактерии размером 1,1-1,5×2,0-6,0 мкм. В мазках они располагаются одиночно или парами. У большинства штаммов существуют капсулы или микрокапсулы.
Температурный оптимум для роста эшерихий 37 °С. Эшерихии ферментируют углеводы с образованием кислоты или кислоты и газа, оксидаза-отрицательны и каталаза-положительны.
Эшерихии входят в состав микрофлоры толстой кишки теплокровных, пресмыкающихся, рыб и насекомых. Эшерихии — основная аэробная микрофлора кишечника, вызывающая, однако, обширную группу заболеваний человека, известных как эшерихиозы.
Эшерихиозы характеризуются не только клиническим полиморфизмом, но и создают особую эпидемиологическую ситуацию. Основное медицинское значение имеет кишечная палочка (Escherichia coli). Кишечные палочки рассматривают как санитарно-показательные микроорганизмы (СПМ) при анализе воды и пищевых продуктов.
Кишечная палочка. Escherichia coli
В настоящее время среди прочих энтеробактерии кишечная палочка — основной возбудитель эшерихиозов у человека.
Морфология кишечной палочки. Культуральные свойства кишечной палочки
Кишечная палочка имеют типичную для энтеробактерий форму и представлены короткими подвижными палочками с закруглёнными концами.
• На плотных средах бактерии образуют плоские выпуклые мутные S-колонии с ровными или слегка волнистыми краями (3-5 мм в диаметре) либо сухие плоские R-колонии с неровными краями.
• В жидких средах растут диффузно, вызывая помутнение среды и образование осадка (реже формируют поверхностную плёнку или пристеночное кольцо).
• На средах Хисса кишечная палочка может образовывать газ. На селективно-дифференциальных средах колонии принимают цвет, соответствующий окраске среды. На агаре Эндо лактоза-положительные эшерихии образуют фукс и ново-красные колонии с металлическим блеском, лактоза-отрицательные — бледно-розовые или бесцветные с тёмным центром. На среде Левина бактерии формируют тёмно-синие колонии с металлическим блеском, а лактоза-отрицательные — бесцветные, на среде Плоскирева — соответственно красные с жёлтым оттенком или бесцветные. На КА могут давать полный гемолиз.
– Также рекомендуем “Биохимические свойства кишечной палочки. Антигены кишечной палочки. Антигенная структура кишечной палочки. Серовары кишечной палочки.”
Источник