Рпга с кишечными диагностиками

Исследование антител к Yersinia Enterocolitica серотип О9 методом РПГА (реакция пассивной, или непрямой гемагглютинации). Кишечный иерсиниоз – острое инфекционное заболевание, характеризующееся преимущественным поражением желудочно-кишечного тракта, с тенденцией к генерализованному поражению различных органов и систем. Возбудителем иерсиниоза чаще всего является мелкая грамотрицательная палочка Yersinia Enterocolitica серотипов О:3, О:8, О:9. Y.enterocolitica распространены в природе широко. Они могут присутствовать в органах и фекалиях многих видов млекопитающих, птиц, земноводных, членистоногих, а также на овощах, корнеплодах, в почве, пыли, воде. Частый путь передачи инфекции – алиментарный (с заражённой пищей, молоком, водой). Человек, как правило, источником заражения не является. Клинические формы иерсиниоза разнообразны и до некоторой степени обусловлены возрастом и физическим состоянием больного. У детей старшего возраста и подростков клиническая картина часто напоминает аппендицит, симптомы включают лихорадку и разлитую боль в животе. У взрослых иерсиниоз часто проявляется двумя синдромами – реактивным артритом и узловатой эритемой. Сначала наблюдается понос с лихорадкой и болью в животе, а через 1-2 недели развивается артрит, который обычно проходит через 1-4 месяца. Узловатая эритема как постинфекционный синдром отмечается преимущественно у женщин среднего возраста. Иерсиниоз в грудном возрасте опасен осложнением в виде сепсиса. Другие предрасполагающие факторы бактериемии включают заболевания печени, гемохроматоз, сахарный диабет, истощение, иммуносупрессивная терапия, передозировка препаратов железа. Более редкие формы иерсиниоза (атипичная клиника обычно обусловлена серотипами, отличными от Y. enterocolitica О:3, О:8, О:9) – ангина на фоне кишечной симптоматики или без неё, пневмония, абсцесс лёгкого, инфекционный эндокардит, инфекции мочевых путей, абсцессы мягких тканей и конъюнктивит. Частота выявления этого возбудителя в кале больных с поносом, по данным разных исследований, составляет 1-3%. Для лабораторного подтверждения иерсиниоза используют микробиологические тесты (см. тест №460 – Посев на иерсинии и определение чувствительности к антибиотикам), серологические исследования – в том числе, РПГА с Y.enterocolitica, выявление антител к факторам вирулентности Y.enterocolitica методом ИФА (см.тесты №№ 238, 239). Титр антител возрастает через 1 неделю заболевания и достигает пика на 2 неделе. Рекомендовано обследовать больного не менее 2 раз – в начале заболевания и с интервалом в 10-15 дней, диагностически достоверным считают 4-кратный и более прирост титров антител. При отсутствии возможности получения парных сывороток (обследование в боле поздние сроки) допускают использование условно-диагностических титров – при кишечном иерсиниозе для взрослых 1:200-1:400, для детей до 10 лет 1:100-1:200. В сомнительных случаях целесообразно проводить исследование параллельно с постановкой РПГА с Y.pseudotubercelosis, проявляющими иммунологическую общность с Y.enterocolitica. Ценность серодиагностики методом РПГА снижают потенциально возможные перекрёстные реакции (Brucella abortus, Rickettsia spp., Salmonella spp., Morganella morganii).

Литература

1. Инструкция по применению диагностикума (утверждена Росздравнадзором 12 окт. 2007 г.).
2. Инфекционные болезни у детей. Ред. Д. Марри. М. Практика, 2006 г., 928 с.

Серологическая диагностика дизентерии – исследование антител к Shigella flexneri подтипов 1-5 методом РПГА (реакция пассивной гемагглютинации).

Бактериальную дизентерию (шигеллез) вызывают бактерии рода Shigella. Этот род включает около 50 серотипов, объединённых по антигенным и биохимическим свойствам в 4 группы: Shigella dysenteriae (A), Shigella flexneri (B) Shigella boydii (C), Shigella sonnei (D). Наиболее высокой патогенностью среди них обладают S. dysenteriae, вырабатывающие цитотоксин Шига (другие виды шигелл его не вырабатывают или почти не вырабатывают).

Наибольшее эпидемическое значение для большинства стран имеют S.flexneri и S.sonnei. Дизентерия, вызванная S.sonnei, протекает в целом легче и реже даёт осложнения, чем S. dysenteriae и S.flexneri. Заражение происходит фекально-оральным путём. Инкубационный период от одних до 7 суток (в среднем 2 – 3 суток), но может сокращаться до 12 и даже до 2 часов. Заболевание начинается остро. Возникает общая интоксикация, повышается температура тела, появляются схваткообразные боли в животе (тенезмы), усиливающиеся перед дефекацией. Стул в типичном случае – сначала обильный водянистый, затем частый малыми порциями, обычно с примесью крови и слизи.

Диагноз ставят на основании выделения возбудителя из кала (см. тест №457 – Посев на патогенную кишечную группу и определение чувствительности к антибиотикам).

Серологические исследования используют в качестве вспомогательного метода в целях подтверждения клинического диагноза при получении отрицательного результата бактериологического обследования; для ретроспективного подтверждения диагноза; при позднем обращения пациента, назначении терапии антибиотиками; затяжном течении заболевания.

Антитела в крови в большей части случаев можно выявить через несколько дней от начала заболевания с максимумом через несколько недель, далее снижением и вероятным исчезновением через 2-3 года. Результат серологического исследования не может быть использован в качестве единственного основания для постановки диагноза. По данным производителя, при острой дизентерии антитела методом РПГА выявляют в 70-80% случаев в титрах от 1:400 до 1:6400 (титр – последнее разведение сыворотки, дающее положительный результат). При затяжном же течении дизентерии антитела в РПГА выявляются значительно реже (в 30-40% случаев) и в менее высоких титрах (от 1:100 до 1:400).

Исследование больным с клиническим диагнозом острой дизентерии рекомендуют проводить в динамике в парных сыворотках в первые дни заболевания (при поступлении в стационар) и через 7-10 дней после первичного исследования. Диагностически достоверным считают более чем 4-кратное увеличение (или падение) титров специфических антител в динамике наблюдения. Установление этиологического диагноза на основании меньшего изменения титров или высокого (1:200 и выше) результата однократной постановки РПГА в первые дни заболевания может привести к значительному проценту диагностических ошибок. Такие результаты надо оценивать с учётом эпидемиологической обстановки, формы заболевания, сроков взятия сыворотки и пр.

Следует принимать во внимание, что результат определения антител может быть положительным после ранее перенесённой инфекции; возможны перекрёстные реакции, связанные с кросс-реагирующими антителами к другим патогенам, прежде всего S.flexneri 6.

Литература

1. Инструкция к набору реагентов (утверждена приказом Росздравнадзора 3.08.2007 № 1915 пр/07).
   
2. «Методические указания по микробиологической диагностике заболеваний, вызываемых энтеробактериями» МЗ от 1984 г., №04-723/3.
   
3. Swapan Kumar Niyogi. Shigellosis. The Journal of Microbiology, April 2005, p.133-143.

Серологическая диагностика дизентерии – исследование антител к Shigella flexneri подтипа 6 методом РПГА (реакция пассивной гемагглютинации).

Бактериальную дизентерию (шигеллез) вызывают бактерии рода Shigella. Этот род включает около 50 серотипов, объединённых по антигенным и биохимическим свойствам в 4 группы: Shigella dysenteriae (A), Shigella flexneri (B) Shigella boydii (C), Shigella sonnei (D).

Самой высокой патогенностью среди них обладают S. dysenteriae, вырабатывающие цитотоксин Шига. Наибольшее эпидемическое значение для большинства стран имеют S.flexneri и S.sonnei. Дизентерия, вызванная S.sonnei, протекает в целом легче и реже даёт осложнения, чем S. dysenteriae и S.flexneri. Заражение происходит фекально-оральным путём. Инкубационный период от одних до 7 суток (в среднем 2 – 3 суток), но может сокращаться до 12 и даже до 2 часов. Заболевание начинается остро. Возникает общая интоксикация, повышается температура тела, появляются схваткообразные боли в животе (тенезмы), усиливающиеся перед дефекацией. Стул в типичном случае – сначала обильный водянистый, затем частый малыми порциями, обычно с примесью крови и слизи.

Диагноз ставят на основании выделения возбудителя из кала (см. тест №457 – Посев на патогенную кишечную группу и определение чувствительности к антибиотикам).

Серологические исследования используют в качестве вспомогательного метода в целях подтверждения клинического диагноза при получении отрицательного результата бактериологического обследования; для ретроспективного подтверждения диагноза; при позднем обращения пациента, назначении терапии антибиотиками; затяжном течении заболевания.

Антитела в крови в большей части случаев можно выявить через несколько дней от начала заболевания с максимумом через несколько недель, далее снижением и вероятным исчезновением через 2-3 года. Результат серологического исследования не может быть использован в качестве единственного основания для постановки диагноза. По данным производителя, при острой дизентерии антитела методом РПГА выявляют в 70-80% случаев в титрах от 1:400 до 1:6400 (титр – последнее разведение сыворотки, дающее положительный результат). При затяжном же течении дизентерии антитела в РПГА выявляются значительно реже (в 30-40% случаев) и в менее высоких титрах (от 1:100 до 1:400).

Исследование рекомендуют проводить в динамике в парных сыворотках больным с клиническим диагнозом острой дизентерии в первые дни заболевания (при поступлении в стационар) и через 7-10 дней после первичного исследования. Диагностически достоверным считают восьмикратное увеличение (или падение) титров специфических антител в динамике наблюдения. Установление этиологического диагноза на основании меньшего изменения титров или только высокого (1:200 и выше) результата однократной постановки РПГА в первые дни заболевания может привести к значительному проценту диагностических ошибок. Такие результаты надо оценивать с учётом эпидемиологической обстановки, формы заболевания, сроков взятия сыворотки и пр. Следует принимать во внимание, что результат определения антител может быть положительным после ранее перенесённой инфекции; возможны перекрёстные реакции, связанные с кросс-реагирующими антителами к другим патогенам, прежде всего S.flexneri подтипов 1-5.

Литература

1. Инструкция к набору реагентов (утверждена приказом Росздравнадзора 3.08.2007 № 1915 пр/07).
2. «Методические указания по микробиологической диагностике заболеваний, вызываемых энтеробактериями» МЗ от 1984 г., №04-723/3.
   
3. Swapan Kumar Niyogi. Shigellosis. The Journal of Microbiology, April 2005, p.133-143