Содержание кишечной палочки в молоке
Текст работы размещён без изображений и формул.
Полная версия работы доступна во вкладке “Файлы работы” в формате PDF
Бактерии группы кишечной палочки – группа бактерий, объединяющая около 100 видов. Основное место обитания – это кишечник млекопитающих (человека, животных) и птиц, но также способны жить в водной среде, молоке, почве, на руках довольно долгое время. Температурой комфортного развития и размножения является +37⁰С, но могут жить и при +20⁰С, погибают при воздействии температуры свыше +60⁰С в течение 15 минут.
Бактерии группы кишечных палочек – большая группа колиформных бактерий, их содержание является санитарно-показательным. По ГОСТу определение БГКП производят в воде, молоке, мясе и других пищевых продуктах, смывах с оборудования и рук персонала.
Самым известным представителем бактерии группы кишечных палочек является кишечная палочка или Escherichia Coli. Некоторые штаммы этих микроорганизмов вызывают пищевые отравления. Также к колиформным бактериям относятся и сальмонеллы. Заражение сальмонеллой вызывает сальмонеллез. Человек, получивший сильнейшее пищевое отравление токсинами этих микроорганизмов, нуждается в обязательной госпитализации.
В соответствии с ГОСТ 9225—68 «Молоко и молочные продукты» при бактериологическом исследовании молока и других молочных продуктов производят определение бактерий группы кишечной палочки.
Работу мы проводили на базе научно-исследовательского инновационного центра микробиологии и биотехнологии кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ВСЭ.
Для исследования были использованы 3 пробы молока, полученные от коров, принадлежащих мегаферме «Октябрьская» Чердаклинского района Ульяновской области (рис. 1).
Рис 1. Исследуемые пробы молока |
Все опыты проводили в трёхкратной последовательности.
Для определения бактерий группы кишечной палочки проводили посевы проб молока в пробирки со средой Кода. Продукт считали не загрязненным кишечной палочкой при наличии зеленого окрашивания среды. При пожелтении среды проводили посев на среду Эндо.
Рис. 2. Посевы на среду Кода проб № 1-3 | |
Рис. 3. Пересев материала пробы № 1 на среду Эндо | |
Рис. 4. Пересев материала пробы № 2 на среду Эндо | |
Рис. 5. Пересев материала пробы № 3 на среду Эндо |
В результате проведенных исследований мы установили, что пробы № 2 и № 3, содержат бактерии группы кишечной палочки. Среда Кода имела желтый цвет в пробах № 2 и № 3, на среде Эндо регистрировали в пробе № 2 наличие колоний без металлического блеска (рис. 4) и в пробе № 3 – колоний с металлическим блеском (рис.5).
Для дальнейшей идентификации бактерий кишечной палочки необходимо провести микроскопию мазков с окрашиванием по Грамму и при наличии грамотрицательных палочек провести биохимическую идентификацию выделенных микроорганизмов.
Библиографический список
1. Загуменнов, А.В. Выделение бактериофагов бактерий вида B.bronchiseptica и Kl.pneumoniae / А.В. Загуменнов, Ю.Б. Васильева, Е.И. Суркова, А.Г. Семанин, Е.Б. Мухин / Материалы Международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Знания молодых для развития ветеринарной медицины и АПК страны». – СПб, издательство ФГБОУ ВПО «СПбГАВМ». – 2015. – С.91-92.
2. Мухин, Е.Б. Разработка препарата на основе бактериофагов / Е.Б. Мухин, Ю.Б. Васильева, А.Г. Семанин, А.В. Загуменнов, Е.И. Суркова / Материалы Международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Знания молодых для развития ветеринарной медицины и АПК страны». – СПб, издательство ФГБОУ ВПО «СПбГАВМ». – 2015. – С. 146-147
3. Семанин, А.Г. Разработка селективной добавки для выделения возбудителя респираторной инфекции / А.Г. Семанин, Ю.Б. Васильева, А.В. Загуменнов, Е.Б. Мухин / Материалы Международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Знания молодых для развития ветеринарной медицины и АПК страны». – СПб, издательство ФГБОУ ВПО «СПбГАВМ». – 2015. – С. 196-197.
4. Суркова, Е.И. Выделение фагов респираторных инфекций / Е.И. Суркова, А.Г. Семанин, Ю.Б. Васильева, А.В. Загуменнов, Е.Б. Мухин / Материалы Международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Знания молодых для развития ветеринарной медицины и АПК страны». – СПб, издательство ФГБОУ ВПО «СПбГАВМ». – 2015. – С. 214-215.
5. Нафеев А.А. Зоонозные инфекции, с природной очаговостью, с позиции эпидемиологического и эпизоотологического диагнозов / А.А. Нафеев, Д.А. Васильев, С.Н. Золотухин, Ю.Б. Васильева // Материалы Международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы ветеринарной науки». – Ульяновск, ГСХА им. П.А. Столыпина, 2015. – С.50-53.
6. Васильева Ю.Б. Подбор селективных компонентов к питательной среде для выделения B.bronchiseptica / Ю.Б. Васильева, А.В. Мастиленко, Д.Г. Сверкалова, Д.А. Васильев, С.Н. Золотухин // Материалы Международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы ветеринарной науки». – Ульяновск, ГСХА им. П.А. Столыпина, 2015. – С.12-15.
7. Васильева Ю.Б. Совершенствование диагностики бордетеллеза / Ю.Б. Васильева, А.В. Мастиленко, Д.А. Васильев, С.Н. Золотухин / Материалы VI Международной научно-практической конференции «Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения». – 2015. – С. 64-67.
8. Мастиленко А.В. Биохимические особенности метаболизма углеводов бактериями рода Bordetella / А.В. Мастиленко, Д.А.Васильев, О.Ю. Борисова, Ю.Б. Васильева, Т.Н. Полетаева, Н.В. Макшанова, АА. Ломакин / Материалы VI Международной научно-практической конференции «Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения». – 2015. – С. 107-111.
9. Зооантропонозные инфекции: учебно-методическое пособие (курс лекций) для студентов и магистрантов факультета ветеринарной медицины и биотехнологии / Ю.Б. Васильева, И.И. Богданов. – Ульяновск: УГСХА, 2015. – 119 с.
10. Зооантропонозные инфекции: учебно-методическое пособие (практикум) для студентов и магистрантов факультета ветеринарной медицины и биотехнологии / Ю.Б. Васильева, И.И. Богданов. – Ульяновск: УГСХА, 2015. – 79 с.
11. Эпизоотология и инфекционные болезни животных. Раздел «Общая эпизоотология»: учебно-методическое пособие (практикум) для студентов факультета ветеринарной медицины и биотехнологии / Ю.Б. Васильева, И.И. Богданов. – Ульяновск: УГСХА, 2015. – 72 с.
12. Эпизоотология и инфекционные болезни животных. Раздел «Общая эпизоотология»: учебно-методическое пособие (курс лекций) для студентов и магистрантов факультета ветеринарной медицины и биотехнологии / Ю.Б. Васильева, И.И. Богданов. – Ульяновск: УГСХА, 2015. – 163 с.
13. Методические указания к выполнению курсовых работ по дисциплине «Эпизоотология и инфекционные болезни животных» для студентов факультета ветеринарной медицины и биотехнологии очной и заочной формы обучения по специальности «Ветеринария» / Ю.Б. Васильева, И.И. Богданов [электронный ресурс]. – Ульяновск: УГСХА, 2015. – 29 с.
14. Методические указания к выполнению курсовых работ по дисциплине «Инфекционные болезни животных» для студентов факультета ветеринарной медицины и биотехнологии очной и заочной формы обучения по направлению подготовки «Ветеринарно-санитарная экспертиза» / Ю.Б. Васильева, И.И. Богданов [электронный ресурс]. – Ульяновск: УГСХА, 2015. – 29 с.
15. Тестовые задания по дисциплине «Эпизоотология и инфекционные болезни животных»: учебное пособие для самоконтроля студентов факультета ветеринарной медицины и биотехнологии / Ю.Б. Васильева, И.И. Богданов. – Ульяновск: УГСХА, 2015. – 90 с.
Источник
О чем говорит наличие БГКП в питьевом молоке?
У одного и того же производителя регулярно в молоке пастеризованном выявляются бактерии группы кишечной палочки (БГКП). Поскольку реализуемое молоко питьевое не соответствует требованиям ТР ТС 033/2013 (приложение № 8) и учитывая, что данное нарушение создает угрозу причинения вреда жизни и здоровью граждан, в действиях изготовителя продукции имеется административное правонарушение, ответственность за которое предусмотрена частью 2 статьи 14.43 КоАП РФ. В основном наличие БГКП свидетельствует об общем санитарном состоянии производства, об эффективности мытья и дезинфекции оборудования и соблюдения правил личной гигиены работниками именно на производстве. С другой стороны, обнаружение БГКП в продукте может свидетельствовать о неправильных условиях хранения. Таким образом, можно сказать, что виновником присутствия и/или роста этого микроорганизма могут быть производитель продукции, перевозчик и продавец. Кто виноват больше, а кто – меньше, с точки зрения потребителя не важно.
Чтобы исключить доводы владельца некачественной продукции в суде о несоблюдении продолжительности доставки лабораторных проб, температуры транспортировки и условий хранения, при отборе проб следует:
1. Указывать в акте отбора проб продукции температуру хранения продукции на основании записей в журнале учета температурных режимов холодильных витрин в торговых залах магазинов или холодильниках;
2. При поступлении пробы в лабораторию указывать в протоколе испытаний температуру в изотермическом контейнере с поступившей продукцией с помощью инфракрасного термометра, прошедшего поверку.
При выполнении указанных мер доводы о нарушении условий хранения проб до начала испытаний молочной продукции будут являться необоснованными.
Молоко питьевое пастеризованное в потребительской упаковке предназначено для непосредственного употребления в пищу. Пастеризованное молоко должно иметь указанную на упаковке жирность, плотность не менее 1027кг/м3, кислотность не более 21°Т, температуру не выше +6°С, фермент фосфатаза должен отсутствовать.
Изготовитель продукции, заявив на маркировке срок годности продукта 5 суток при температуре хранения ((4±2)°С, должен гарантировать отсутствие бактерий группы кишечной палочки в течение этих пяти суток плюс коэффициент резерва для скоропортящихся продуктов 1,5, т.е. при микробиологических исследованиях на восьмой день хранения от даты производства наличие БГКП не допускается в 0,01см3. Если объем стандартной капли воды – 0,05см3, а молоко на 83% состоит из воды, то наличие БГКП всего в 0,01см3
молока указывает на огромное количество бактерий в стакане молока.
Бактерии группы кишечной палочки являются представителями сем. Enterobacteriaceae, в эту группу входят род эшерихия (Escherichia), цитробактер (Citrobacter), энтеробактер (Enterobacter), клебсиелла (Klebsiella), серрация (Serratia) – бесспоровые, грамотрицательные, аэробные и факультативно-анаэробные палочки, сбраживающие лактозу с образованием кислоты и газа. Микроорганизмы, входящие в семейство, являются представителями кишечной микрофлоры.
Получив свое название «условно патогенные», бактерии группы кишечной палочки далеко не так безобидны. Условно патогенные микроорганизмы – это микроорганизмы, которые в обычных условиях обитания в организме человека или животных не вызывают инфекционного процесса, но могут стать причиной заболевания, особенно если попадают в восприимчивый организм штаммы микроорганизмов, продуцирующих токсины. Например, энтерогеморрагические штаммы Escherichia coli способны вызвать у людей геморрагическую диарею и гемолитический уремический синдром. Гемолитико-уремический синдром обычно развивается спустя как минимум одну неделю после первых признаков диареи и проявляется в виде гемолитической анемии, тромбоцитопении (снижение тромбоцитов – клеток, участвующих в свертывании крови) и острой почечной недостаточности.
Штаммы с повышенной патогенностью вызывают заболевание после заражения в низкой дозе, достаточно алиментарным путем получить 1-100 клеток бактерий. Пищевое отравление может вызвать продукт или с очень большой обсемененностью (содержанием) этих бактерий, или же продукт, в котором присутствуют отдельные небезопасные для человека представители этой группы (патогенные).
Молоко, а также изготовляемые на его основе молочные продукты являются повседневным продуктом питания населения, поэтому особенно важно обращать внимание на безопасность молока для здоровья человека. «Безопасность пищевых продуктов – состояние обоснованной уверенности в том, что пищевые продукты при обычных условиях их использования не являются вредными и не представляют опасности для здоровья нынешнего и будущих поколений» (Федеральный закон от 02.01.2000 № 29-ФЗ).
Положениями пункта 1 статьи 36, части 1 статьи 38 Федерального закона N 184-ФЗ предусмотрено, что за нарушение требований технических регламентов изготовитель (исполнитель, продавец, лицо, выполняющее функции иностранного изготовителя) несет ответственность в соответствии с законодательством Российской Федерации.
Источник
https://ria.ru/20200323/1568993665.html
Роскачество обнаружило в молоке кишечную палочку
Роскачество обнаружило в молоке кишечную палочку
Роскачество провело повторное исследование молока шести популярных торговых марок и обнаружило в одном из продуктов кишечную палочку. РИА Новости, 23.03.2020
2020-03-23T08:29
2020-03-23T08:29
2020-03-23T13:41
молоко
роскачество
общество
/html/head/meta[@name=’og:title’]/@content
/html/head/meta[@name=’og:description’]/@content
https://cdn21.img.ria.ru/images/155982/90/1559829024_0:79:1500:923_1400x0_80_0_0_73d408e16bbad589c0d2d830bd52a807.jpg
МОСКВА, 23 мар — РИА Новости. Роскачество провело повторное исследование молока шести популярных торговых марок и обнаружило в одном из продуктов кишечную палочку.По итогам первого исследования в молоке четырех торговых марок (из 90) выявили антибиотики и их следы, у 46 торговых марок — их допустимое количество.Теперь эксперты дополнительно изучили молоко жирностью 3,2% от шести разных производителей. В частности, его протестировали на наличие потенциально вредных веществ (тяжелые металлы, пестициды, радионуклиды, меламин и консерванты), антибиотики и их следы, микробиологию (бактерии группы кишечной палочки), а также оценили по органолептическим показателям (вкус, цвет, запах и консистенция продукта).Согласно результатам, пять продуктов сохранили свой статус или улучшили позиции и устранили замечания.”В нынешнем исследовании не выявлено фальсификации: нет растительных жиров, сухого молока, снижения жирности. Ранее в одном из шести переисследованных товаров фальсификация присутствовала. При этом, хотя прежних нарушений у молока не выявлено, у одного из шести товаров рейтинг все же обнулен за другое нарушение — наличие кишечной палочки”, — сообщили в компании.
https://ria.ru/20200320/1568878015.html
https://ria.ru/20200322/1568981608.html
РИА Новости
Россия, Москва, Зубовский бульвар, 4
7 495 645-6601
https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/
2020
РИА Новости
Россия, Москва, Зубовский бульвар, 4
7 495 645-6601
https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/
Новости
ru-RU
https://ria.ru/docs/about/copyright.html
https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/
РИА Новости
Россия, Москва, Зубовский бульвар, 4
7 495 645-6601
https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/
https://cdn24.img.ria.ru/images/155982/90/1559829024_84:0:1417:1000_1400x0_80_0_0_1cd6f78d209a339e1ce6149c3436b174.jpg
РИА Новости
Россия, Москва, Зубовский бульвар, 4
7 495 645-6601
https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/
РИА Новости
Россия, Москва, Зубовский бульвар, 4
7 495 645-6601
https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/
молоко, роскачество, общество
08:29 23.03.2020 (обновлено: 13:41 23.03.2020)
МОСКВА, 23 мар — РИА Новости. Роскачество провело повторное исследование молока шести популярных торговых марок и обнаружило в одном из продуктов кишечную палочку.
По итогам первого исследования в молоке четырех торговых марок (из 90) выявили антибиотики и их следы, у 46 торговых марок — их допустимое количество.
Теперь эксперты дополнительно изучили молоко жирностью 3,2% от шести разных производителей. В частности, его протестировали на наличие потенциально вредных веществ (тяжелые металлы, пестициды, радионуклиды, меламин и консерванты), антибиотики и их следы, микробиологию (бактерии группы кишечной палочки), а также оценили по органолептическим показателям (вкус, цвет, запах и консистенция продукта).
Согласно результатам, пять продуктов сохранили свой статус или улучшили позиции и устранили замечания.
“В нынешнем исследовании не выявлено фальсификации: нет растительных жиров, сухого молока, снижения жирности. Ранее в одном из шести переисследованных товаров фальсификация присутствовала. При этом, хотя прежних нарушений у молока не выявлено, у одного из шести товаров рейтинг все же обнулен за другое нарушение — наличие кишечной палочки”, — сообщили в компании.
Источник
Санитарно-бактериологическое исследование молока и молочных продуктов Ф. К. Черкес, Н. А. Бельская
Молоко и молочные продукты являются благоприятной средой для размножения микроорганизмов.
При изготовлении некоторых молочных продуктов: творога, кефира, простокваши, ряженки и других используют специальную микрофлору, например молочнокислые стрептококки, молочно-кислые ацидофильные палочки и др. Микрофлора, используемая для приготовления этих продуктов, является для них специфичной и не учитывается.
Неспецифической микрофлорой, встречающейся в молоке и молочных продуктах, являются аэробные бактерии: БГКП, стафилококки и др.
С молоком могут передаваться возбудители туберкулеза, бруцеллеза, сальмонеллеза, сибирской язвы, вирус полиомиелита, анаэробные бациллы и т. д.
Обсеменение молока и молочных изделий неспецифической микрофлорой может произойти в момент удоя, транспортировки, хранения и т. д.
Исследование молока и молочных продуктов проводят согласно ГОСТу 9225-68.
Отбор проб. Пробы жидких и полужидких продуктов после тщательного их перемешивания отбирают в количестве 50-100 мл в стерильные колбы. Пробы сливочного масла, сыра, творога отбирают с помощью стерильного щупа из глубины продукта. Перед взятием пробы масла, творога верхний слой продукта тщательно зачищают, а поверхность сыра в месте отбора пробы прижигают раскаленным ножом. Из расфасованных продуктов берут по 2 образца в оригинальной упаковке. Взятые образцы сопровождают документом, в котором указывают:
1. Номер образца.
2. Наименование и сорт продукта.
3. Дату изготовления.
4. Дату и час отбора пробы.
5. Объем необходимых исследований.
6. Должность и подпись лица, отобравшего пробу.
Микробиологическое исследование продукта должно производиться не позднее чем через 4 ч с момента отбора пробы. При транспортировке температура не должна превышать 6° С.
ГОСТ для молока и молочных изделий предусматривает определение общего числа бактерий в 1 г (мл) и определение титра цитратотрицательных (цитратнегативных) разновидностей БГКП (коли-титр).
Определение общего числа бактерий
Подготовка образцов для исследования. Из молока и других молочных продуктов готовят десятикратные разведения (по общепринятой методике). Количество разведений для каждого вида продукта готовят с учетом наиболее вероятного микробного обсеменения (табл. 56).
Таблица 56. Разведение молока и молочных продуктов
Примечание. Для определения общего количества бактерий следует выбирать те разведения, при посевах которых на чашках вырастает не менее 50 и не более 300 колоний.
Посев. По 1 мл каждого разведения вносят в 2-3 стерильные чашки Петри и заливают 12-15 мл растопленного и остуженного до 45° С питательного агара. Предварительно чашки маркируют. Сразу после заливки содержимое чашки перемешивают (путем легкого вращательного покачивания) для равномерного распределения посеянного материала. Посевы ставят в термостат при 37° С на 48 ч.
По истечении срока инкубации чашки вынимают и подсчитывают число колоний при помощи счетчика. Число колоний, выросших на каждой чашке, умножают на соответствующее разведение. Полученные результаты по отдельным чашкам складывают, делят на количество чашек и получают среднее арифметическое, которое является показателем общего числа бактерий в 1 г (мл).
Соответствующие ГОСТы регламентируют качество продуктов, что устанавливают по допустимым показателям: общему числу микробов и коли-титру. Пример для двух видов продуктов представлен в табл. 57.
Таблица 57. Показатели общего числа бактерий и коли-титра в молоке
Примечание. Для других молочных продуктов также имеется ГОСТ обусловливающий допустимое количество микробов в 1 мл (г) продукта. Буквы А и Б обозначают категорию продукта.
В кисломолочных продуктах (кефир, простокваша, творог, сметана и др.), содержащих обильную специфическую микрофлору, общее количество бактерий не определяют, а контролируют состав микрофлоры. Для этого из кисломолочных продуктов готовят препараты и красят метиленовым синим. В поле зрения препарата должны находиться только специфические для данного продукта микроорганизмы. Например, для простокваши – молочно-кислые стрептококки и палочки; для кефира – молочно-кислые стрептококки и палочки, единичные дрожжи. Микроскопия позволяет выявить микроорганизмы порчи (плесени и большое количество дрожжей).
Определение БГКП
Обсемененность молока и молочных продуктов бактериями группы кишечной палочки определяют бродильным методом. Бродильный титр – это то наименьшее количество продуктов, выраженное в граммах или миллилитрах, в котором присутствует кишечная палочка. Согласно ГОСТу 9225-68 учитываются только цитратнегативные разновидности кишечной палочки (рис. 57).
Рис. 57. Определение коли-титра молока
Бродильный метод
Первый день исследования
Посев молока и молочно-кислых продуктов производят в 6 пробирок с 5 мл среды Кесслер. В 3 пробирки засевают по 1 мл цельного продукта, в другие 3 пробирки по 1 мл из разведения 1:10 (0,1 мл). Посевы инкубируют в термостате при 43° С 18-24 ч.
Второй день исследования
Из каждой забродившей пробирки производят посев на сектор среды Эндо и инкубируют при 37° С 18-24 ч.
Третий день исследования
При отсутствии типичных для БГКП колоний продукт считают незагрязненным кишечной палочкой.
При наличии типичных для БГКП колоний делают мазки, окрашивают по Граму и микроскопируют. При обнаружении грамотрицательных палочек ставят пробу на оксидазу и производят посев на среду с глюкозой и среду Козера.
Четвертый день исследования
Производят учет результатов. Наличие кислоты и газа на среде с глюкозой и отсутствие роста на среде Козера свидетельствует о наличии цитратнегативных разновидностей кишечной палочки. Коли-титр вычисляют по табл. 58.
Таблица 58. Вычисление коли-титра в пастеризованном молоке, сливках, кефире, простокваше, ацидофильном молоке
Примечание. Вычисление коли-титра для масла, сыра, творожных изделий, мороженого и молочных консервов проводят по другим таблицам, указанным в ГОСТе.
Присутствие патогенных микроорганизмов в молоке и молочных продуктах недопустимо.
Контрольные вопросы
1. Как определяют в молоке и молочных продуктах общее число микробов?
2. Как определяют коли-титр?
3. Какие микроорганизмы могут встречаться в молоке и молочных продуктах?
Питательные среды
Среда Кесслер. См. с. 484.
Среда Козера. К 1 л дистиллированной воды добавляют 1,0 г фосфата однозамещенного калия, 0,2 г сульфата магния, 2,5-3,0 г цитрата натрия. Раствор стерилизуют в автоклаве при 1 атм в течение 15 мин, добавляют 10 мл 0,5% спиртового раствора бромтимолового синего и разливают в стерильные пробирки.
Среда глюкозой. См. главу 7.
Желточно-солевая среда. См. главу 14.
Источник