Темнопольная микроскопия применяется для изучения кишечной палочки

Темнопольная микроскопия применяется для изучения кишечной палочки thumbnail

1. Сущность научного открытия Д.И. Ивановского:

  • 1. создание первого микроскопа;
  • 2. открытие вирусов;
  • 3. открытие явления фагоцитоза;
  • 4. получение антирабической вакцины;
  • 5. открытие явления трансформации.

2. Темнопольная микроскопия применяется для изучения:

  • 1. кишечной палочки;
  • 2. риккетсий;
  • 3. стафилококка;
  • 4. хламидий;
  • 5. бледной трепонемы.

3. Назовите метод окраски, применяемый для возбудителей туберкулеза:

  • 1. Циль-Нильсена;
  • 2. Ожешко;
  • 3. Бурри-Гинса;
  • 4. Нейссера;
  • 5. Романовского-Гимзы.

4. Shigella flexneri вызывает:

  • 1. чуму;
  • 2. возвратный тиф;
  • 3. бруцеллез;
  • 4. дифтерию;
  • 5. дизентерию.

5. К спорообразующим бактериям относятся:

  • 1. стрептококки;
  • 2. клостридии;
  • 3. нейссерии;
  • 4. сальмонеллы;
  • 5. коринебактерии.

6. Возбудителем сыпного тифа является:

  • 1. Bordetella pertussis;
  • 2. Salmonella typhi;
  • 3. Borrelia recurrentis;
  • 4. Rickettsia prowazekii;
  • 5. Yersinia pestis.

7. Возбудителем сибирской язвы является:

  • 1. Corynebacterium diphtheriae;
  • 2. Bacteroides fragilis;
  • 3. Klebsiella pneumoniae;
  • 4. Bacillus anthracis;
  • 5. Pseudomonas aeruginosa.

8. Какой из видов клостридии вызывает развитие псевдомембранозного колита на фоне антибиотикотерапии?

  • 1. Clostridium perfringens;
  • 2. Clostridium septicum;
  • 3. Clostridium difficile;
  • 4. Clostridium histolyticum;
  • 5. Clostridium bifermentas.

9. Основным механизмом молекулярного действия хинолонов является:

  • 1. ингибирование синтеза ДНК;
  • 2. ингибирование синтеза белка на уровне 50S субъединицы рибосомы;
  • 3. ингибирование синтеза белка на уровне 30S субъединицы рибосомы;
  • 4. ингибирование синтеза клеточной стенки;
  • 5. нарушение функционирования цитоплазматической мембраны.

10. Ингибирование синтеза клеточной стенки характерно для:

  • 1. гентамицина;
  • 2. ципрофлоксацина;
  • 3. нистатина;
  • 4. ампициллина;
  • 5. эритромицина.

11. Препаратом выбора при лечении хламидийной инфекции является:

  • 1. ампициллин;
  • 2. азитромицин;
  • 3. нистатин;
  • 4. гентамицин;
  • 5. клиндамицин.

12. Антибиотиком выбора при лечении госпитальных инфекций, вызванных штаммами метициллинрезистентных стафилококков, является:

  • 1. ампициллин;
  • 2. оксациллин;
  • 3. ванкомицин;
  • 4. эритромицин;
  • 5. гентамицин.

13. Антибиотиком выбора для лечения инфекций, вызванных облигатными неспорообразующими анаэробами, является:

  • 1. клиндамицин;
  • 2. канамицин;
  • 3. рокситромицин;
  • 4. ципрофлоксацин;
  • 5. пенициллин.

14. Энтеротоксин продуцируется бактерией:

  • 1. Clostridium tеtani
  • 2. Corynebacterium diphtheriae
  • 3. Vibrio cholerae
  • 4. Bacillus anthracis
  • 5. Salmonella typhi

15. Ботулинический токсин по механизму действия на клетку-мишень является:

  • 1. блокатором передачи нервного импульса;
  • 2. ингибитором синтеза белка;
  • 3. активатором аденилатциклазной системы;
  • 4. эксфолиативным токсином;
  • 5. гемолизином.

16. Дифтерийный токсин является:

  • 1. эндотоксином;
  • 2. нейротоксином;
  • 3. энтеротоксином;
  • 4. гистотоксином;
  • 5. лейкоцидином.

17. Эндотоксин играет основную роль в патогенезе инфекции, вызываемой:

  • 1. Vibrio cholerae;
  • 2. Staphylococcus aureus;
  • 3. Salmonella typhi;
  • 4. Corynebacterium diphtheriae;
  • 5. Clostridium perfringens.

18. Развитие диареи связано с действием:

  • 1. ботулинического токсина;
  • 2. дифтерийного токсина;
  • 3. термолабильного энтеротоксина;
  • 4. столбнячного токсина;
  • 5. в-гемолизина.

19. Дифтерийный токсин по механизму действия на клетку-мишень является:

  • 1. активатором аденилатциклазной системы;
  • 2. ингибитором синтеза белка;
  • 3. блокатором передачи нервного импульса;
  • 4. эксфолиативным токсином.

20. Clostridium tetani вызывает следующий тип инфекции:

  • 1. бактериемию;
  • 2. вирусемию;
  • 3. токсинемию;
  • 4. септицемию.

21. Бактериологический метод диагностики применяется для:

  • 1. выделения и идентификации вирусов – возбудителей заболеваний;
  • 2. выявления антигена в исследуемом материале;
  • 3. выделения и идентификации бактерий – возбудителей заболеваний;
  • 4. обнаружения антител в сыворотке больного.

22. В качестве исследуемого материала для серологической диагностики (определение титра антител) используют:

  • 1. гной;
  • 2. сыворотку крови;
  • 3. мочу;
  • 4. мокроту;
  • 5. желчь.

23. Какой метод используют для стерилизации сыворотки крови:

  • 1. стерилизация воздействием ионизирующей радиации;
  • 2. стерилизация паром под давлением;
  • 3. стерилизация сухим жаром;
  • 4. фильтрование с помощью мембранных фильтров;
  • 5. стерилизация УФ-облучением.

24. Применение какого вакцинного препарата связано с формированием стойкого местного иммунитета:

  • 1. рекомбинантной вакцины против гепатита В;
  • 2. полисахаридной менингококковой вакцины;
  • 3. противогриппозной сплит-вакцины;
  • 4. вакцины холерной химической;
  • 5. пероральной трехвалентной полиомиелитной вакцины.

25. Выберите из перечисленных вакцинных препаратов препарат, относящийся к группе лечебных вакцин:

  • 1. АКДС;
  • 2. БЦЖ;
  • 3. гонококковая вакцина4
  • 4. гриппозная вакцина;
  • 5. сибиреязвенная вакцина.

26. Вакцина БЦЖ относится к типу:

  • 1. инактивированных корпускулярных;
  • 2. химических;
  • 3. синтетических;
  • 4. живых аттенуированных;
  • 5. генноинженерных.

27. Вакцина против гепатита В представляет собой:

  • 1. генноинженерную дрожжевую вакцину;
  • 2. инактивированную культуральную вакцину;
  • 3. сплит-вакцину;
  • 4. живую культуральную вакцину;
  • 5. субъединичную вакцину.

28. Какие вирусы содержат в составе вириона обратную транскриптазу:

  • 1. парамиксовирусы;
  • 2. ретровирусы;
  • 3. реовирусы;
  • 4. аденовирусы;
  • 5. энтеровирусы.

29. С именем Луи Пастера связаны следующие научные открытия: а) разработка метода аттенуации микроорганизмов; б) открытие явления фагоцитоза; в) создание антирабической вакцины; г) открытие и изучение процессов брожения у микроорганизмов; д) введение в практику микробиологии метода выделения чистых культур бактерий на плотных питательных средах. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. а, в, г;
  • 2. б, в, г;
  • 3. а, г, д;
  • 4. в, г, д;
  • 5. б, г, д.

30. К грамотрицательным бактериям относятся: а) энтеробактерии; б) клостридии; в) псевдомонады; г) бактероиды; д) нейссерии. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. а, в, г, д;
  • 2. а, б, в, г;
  • 3. б, в, г, д;
  • 4. в, г, д;
  • 5. б, г, д.

31. К кокковым формам микроорганизмов относятся: a) Neisseria meningitides; б) Klebsiella pneumoniae; в) Streptococcus pneumoniae; г) Bacteroides fragilis; д) Staphylococcus aureus. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. а, б, в;
  • 2. а, в, д;
  • 3. б, в, д;
  • 4. б, г, д;
  • 5. в, г, д.

32. К облигатным анаэробам относятся: а) коринебактерии; б) бациллы; в) бактероиды; г) клостридии; д) бифидобактерии. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. а, б, в;
  • 2. в, г, д;
  • 3. б, г, д;
  • 4. а, в, д;
  • 5. б, в, д.

33. К бактериям, образующим эндоспоры, относятся: а) бациллы; б) бифидобактерии; в) клостридии; г) стафилококки; д) лактобактерии. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. г, д;
  • 2. б, в;
  • 3. а, в;
  • 4. б, г;
  • 5. а, б.

35. Световая микроскопия включает в себя следующие разновидности: а) фазово-контрастную микроскопию; б) электронную микроскопию; в) темнопольную микроскопию; г) микроскопию в затемненном поле; д) иммерсионную микроскопию. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. а, в, г, д;
  • 2. а, б, г, д;
  • 3. б, в, г, д;
  • 4. б, в, г;
  • 5. в, г, д.

36. К методам «холодной» стерилизации относятся: а) стерилизация текучим паром; б) стерилизация УФ-облучением; в) стерилизация при помощи бактериальных фильтров; г) стерилизация паром под давлением; д) сухожаровая стерилизация. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. а, б;
  • 2. а, г;
  • 3. а, д;
  • 4. б, в;
  • 5. б, д.

37. Какие питательные среды используют для культивирования стрептококков: а) мясо-пептонный агар; б) кровяной агар; в) сывороточный агар; г) среду Эндо; д) желточно-солевой агар. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. а, б;
  • 2. б, в;
  • 3. а, г;
  • 4. б, д;
  • 5. а, в.

38. Мишенями для антибиотиков в бактериальной клетке являются: а) клеточная стенка; б) нуклеоид; в) цитоплазматическая мембрана; г) споры; д) рибосомы. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. б, в, г, д;
  • 2. а, б, г, д;
  • 3. а, б, в, д;
  • 4. в, г, д;
  • 5. б, в, г.

39. Какие методы применяют для определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам: а) метод диффузии в агар («метод дисков»); б) метод двойной иммунодиффузии в геле по Оухтерлони; в) метод серийных разведений; г) метод радиальной иммунодиффузии в геле по Манчини; д) метод иммунофлюоресцснции. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. а, б;
  • 2. б, в;
  • 3. а, в;
  • 4. б, г;
  • 5. а, д.

40. Для лечения инфекций бактероидной этиологии используют: а) клиндамицин; б) канамицин; в) метронидазол; г) ципрофлоксацин. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. а, б;
  • 2. б, в;
  • 3. а, в;
  • 4. в, г;
  • 5. б, г.

41. Какие из приведенных утверждений являются правильными:а) реализация приобретенной лекарственной устойчивости возможна путем инактивации антибиотика бактериальном ферментом; б) р-лактамазы – ферменты, продуцируемые бактериями и разрушающие р-лактамное кольцо соответствующих антибиотиков; в) р-лактамазы используются в качестве антибактериальных препаратов; г) клавулановая кислота является ингибитором р-лактамаз; д) клавулановая кислота используется в качестве самостоятельного антибактериального препарата. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. а, б, д;
  • 2. а, б, в;
  • 3. а, б, г;
  • 4. а, г, д;
  • 5. б, г, д.

42. В состав биотерапевтических препаратов, применяемых для коррекции микрофлоры кишечника, входят: а) бифидобактерии; б) лактобактерии; в) стафилококки; г) сальмонеллы; д)эшерихии. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. а, б, в;
  • 2. б, г, д;
  • 3. б, в, г;
  • 4. а, б д;
  • 5. в, г, д.

43. Представителями нормальной микрофлоры влагалища являются: а) лактобактерии; б) бифидобактерии; в) стрептококки; г) клостридни; д) бактероиды. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. а, б, в, д;
  • 2. а, в, г, д;
  • 3. б, в, г, д;
  • 4. б, г, д;
  • 5. а, г, д.

44. Антитоксическими лечебно-профилактическими сыворотками являются: а) противоботулиническая; б) противостолбнячная; в) противодифтерийная; г) противолептоспирозная; д) противогангренозная. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. а, в, г, д;
  • 2. а, б, в, д;
  • 3. б, в, г, д;
  • 4. б, г, д;
  • 5. а, г.

45. Какие препараты используются для активной иммунизации:а) менингококковая вакцина; б) АКДС; в) противодифтерийная сыворотка; г) интерферон; д) иммуноглобулин человека нормальный. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. б, в;
  • 2. в, г;
  • 3. г, д;
  • 4. а, б;
  • 5. б, д.

46. Свойствами, характерными для бактериальных экзотоксинов, являются: а) специфичность действия; б) термолабильность; в) возможность перехода в анатоксин; г) липополисахаридная химическая природа; д) избирательная фиксация на рецепторах клеток-мишеней. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. а, в, г, д;
  • 2. а, б, в, д;
  • 3. а, б;
  • 4. а, б, г;
  • 5. а, б, д.

47. Действие эндотоксина проявляется следующими биологическими эффектами: а) пирогенным; б) увеличением проницаемости сосудистой стенки; в) активацией системы комплемента; г) диареей; д) развитием параличей. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. а, д;
  • 2. а, г;
  • 3. а, б, в;
  • 4. а, б, в, д;
  • 5. а, в, г.

48. При каких инфекциях основную роль в развитии инфекционного процесса играет экзотоксин возбудителя: а) столбняк; б) холера; в) дифтерия; г) гонорея; д) ботулизм. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. б, в, г, д;
  • 2. а, б, г, д;
  • 3. а, б, в, д;
  • 4. а, г, д;
  • 5. б, г, д.

49. Основными факторами патогенности синегнойной палочки являются: а) экзотоксин А; б) гемолизины; в) протеолитические ферменты; г) гликопротеид экстрацеллюлярной слизи; д) нейротоксин. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. а, б, в;
  • 2. а, б, г, д;
  • 3. б, в, г, д;
  • 4. а, г, д;
  • 5. б г д.

50. К факторам естественной резистентности организма относятся: а) специфические антитела; б) интерферон; в) естественные киллеры (NK); г) макрофаги; д) система комплемента. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. а, б, г;
  • 2. а, в, д;
  • 3. а, в, г, д;
  • 4. в, г, д;
  • 5. б, в, г, д.

51. К антропонозным инфекциям относятся: а) кампилобактериоз; б) шигеллез; в) брюшной тиф; г) гонорея; д) легионеллез. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. а, б, в;
  • 2. б, в, г;
  • 3. в, г, д;
  • 4. а, г, д;
  • 5. б, г, д.

52. Воздушно-капельным путем передаются: а) сыпной тиф; б) дифтерия; в) корь; г) гепатит А; д) коклюш. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. а, б, в;
  • 2. а, г, д;
  • 3. б, в, д;
  • 4. б, г, д;
  • 5. в, г, д.

53. К молекулярно-генетическим методам диагностики относятся: а) полимеразная цепная реакция (ПЦР); б) ДНК-ДНК-гибридизация; в) латекс-агглютинация; г) реакция связывания комплемента (РСК); д) реакция непрямой гемагглютинации (РИГА). Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. а, б;
  • 2. в, г;
  • 3. б, в;
  • 4. а, г;
  • 5. г, д.

55. К серологическим реакциям относятся: а) РСК (реакция связывания комплемента); б) РНГА (реакция непрямой гемагглютинации); в) реакция вирусной гемагглютинации; г) реакция преципитации; д) ПЦР (полимеразная цепная реакция). Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. б, г, д;
  • 2. а, в, г;
  • 3. б, в, д;
  • 4. а, б, г;
  • 5. в, г, д.

56. В каких серологических реакциях участвует комплемент: а) преципитации; б) агглютинации; в) РСК; г) иммунного гемолиза; д) иммунофлюоресценции. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. а, г;
  • 2. в, г;
  • 3. а, б;
  • 4. в, д;
  • 5. а, в, г.

57. В диагностике вирусных инфекций применяют методы: а) вирусо-логический; б) микроскопический; в) серологический; г) аллергический; д) бактериологический. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. в, г, д;
  • 2. а, б, в;
  • 3. а, г, д;
  • 4. б, в, г;
  • 5. б, г, д.

58. В диагностике гепатита В используют методы: а) выделение возбудителя в культуре клеток; б) заражение чувствительных лабораторных животных; в) выявление циркулирующих антител к антигенам вируса в сыворотке крови; г) выявление антигенов возбудителя в исследуемом материале; д) кожно-аллергические пробы. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. в, г;
  • 2. б, в;
  • 3. а, б;
  • 4. г, д;
  • 5. а, д.

59. Характерными свойствами вирусов являются: а) наличие одного типа нуклеиновой кислоты; б) способность синтезировать экзотоксины; в) абсолютный паразитизм; г) отсутствие собственного белоксинтезирующего аппарата; д) дизъюнктивный способ репродукции. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. а, б, д;
  • 2. а, в, г, д;
  • 3. б, в, г, д;
  • 4. б, в, д;
  • 5. б, г, д.

60. Противовирусными препаратами являются: а) антибиотики;б) интерфероны; в) аномальные нуклеозиды; г) иммуноглобулины; д) бактериофаги. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. в, г, д;
  • 2. а, б, в;
  • 3. а, г, д;
  • 4. б, г, д;
  • 5. б, в, г.

61. В состав сложных вирусов входят: а) капсид; б) суперкапсид; в) нуклеиновая кислота; г) матриксный белок; д) рибосомы. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. а, б, в, г;
  • 2. б, в, г, д;
  • 3. а, в, г, д;
  • 4. б, г, д;
  • 5. в, г, д.

62. К сложным вирусам относятся: а) вирус полиомиелита; б) вирус кори; в) вирус гриппа; г) вирус гепатита А; д) вирус гепатита В. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. а, б, в;
  • 2. б, в, д;
  • 3. а, г, д;
  • 4. б, г, д;
  • 5. в, г, д.

63. Пассивный искусственный иммунитет формируется при использовании следующих препаратов: а) химических вакцин; б) генноинженерных вакцин; в) антитоксических сывороток; г) противовирусных иммуноглобулинов; д) бифидумбактерина. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. а, б;
  • 2. а, д;
  • 3. а, б, д;
  • 4. б, в, г;
  • 5. в, г.

64. Обязательная плановая вакцинация проводится для профилактики: а) столбняка; б) холеры; в) брюшного тифа; г) дифтерии; д) туберкулеза. Выберите правильную комбинацию ответов:

  • 1. а, б;
  • 2. а, б, д;
  • 3. а, г, д;
  • 4. а, г;
  • 5. а, в, г.

Источник

Оглавление темы “Методы выделения бактерий. Микроскопия. Питательные среды для культивирования бактерий.”:

1. Методы выделения бактерий. Микроскопия материала. Микроскоп. Светооптическая микроскопия. Световая микроскопия.

2. Темнопольная микроскопия. Принципы темнопольной микроскопии. Фазово-контрастная микроскопия. Техника фазово-контрастной микроскопии.

3. Поляризационная микроскопия. Интерференционная микроскопия. Люминесцентная микроскопия. Техника микроскопии.

4. Электронная микроскопия. Просвечивающий электронный микроскоп. Подготовка материала к микроскопии. Нативные препараты.

5. Окрашенные препараты. Окрашенные мазки. Отбор материала для микроскопии. Фиксация препарата. Фиксация мазка. Фиксация бактерий.

6. Окрашивание мазка. Окрашивание бактерий. Специальные методы окраски бактерий. Окраска бактерий по Граму. Дифференцирующие методы окрашивания.

7. Питательные среды для культивирования бактерий. Питательные среды для бактерий. Источники азота и углерода для бактерий. Виды питательных сред для выращивания бактерий.

8. Классификации питательных сред для культивирования бактерий. Классификация сред для бактерий. Искусственные питательные среды для бактерий. Естественные среды для выращивания бактерий.

9. Характеристики питательных сред для культивирования бактерий. Консервирующие среды для бактерий. Среды обогащения для бактерий. Элективные и селективные питательные среды для выращивания бактерий.

10. Дифференциально-диагностические питательные среды для культивирования бактерий. Среды содержащие белки. Среды содержащие углеводы. Среды для определения редуцирующей способности бактерий.

Темнопольная микроскопия. Принципы темнопольной микроскопии. Фазово-контрастная микроскопия. Техника фазово-контрастной микроскопии.

Темнопольная микроскопия позволяет наблюдать живые бактерии. Для темнопольной микроскопии используют темнопольный конденсор, выделяющий контрастирующие структуры неокрашенного материала. Перед началом работы свет устанавливают и центрируют по светлому полю, затем светлопольный конденсор удаляют и заменяют соответствующей системой (например, ОИ-10 или ОИ-21). Препарат готовят по методу «раздавленной капли», делая его как можно более тонким (толщина покровного стекла не должна быть толще 1 мм). Наблюдаемый объект выглядит как освещенный на тёмном поле. При этом лучи от осветителя падают на объект сбоку, а в линзы микроскопа поступают только рассеянные лучи (рис. 11-2). В качестве иммерсионной жидкости пригодно вазелиновое масло.

Темнопольная микроскопия. Принципы темнопольной микроскопии. Фазово-контрастная микроскопия. Техника фазово-контрастной микроскопии
Рис. 11-2. Схема светового микроскопа с темнопольным конденсором.

Фазово-контрастная микроскопия. Техника фазово-контрастной микроскопии

Темнопольная микроскопия. Принципы темнопольной микроскопии. Фазово-контрастная микроскопия. Техника фазово-контрастной микроскопии
Рис. 11-3. Схема фазово-контрастного микроскопа.

Фазово-контрастная микроскопия позволяет изучать живые и неокрашенные объекты за счёт повышения их контрастности. При прохождении света через окрашеные объекты происходит изменение амплитуды световой волны, а при прохождении через неокрашенные — фазы световой волны, что используют для получения высококонтрастного изображения в фазово-контрастной (рис. 11-3) и интерференционной микроскопии. Для повышения контрастности фазовые кольца покрывают металлом, поглощающим прямой свет, не влияя на сдвиг фазы. В оптической системе микроскопа применяют специальный конденсор с револьвером диафрагм и центрирующим устройством; объективы заменяют на иммерсионные объективы-апохроматы.

– Также рекомендуем “Поляризационная микроскопия. Интерференционная микроскопия. Люминесцентная микроскопия. Техника микроскопии.”

Источник

ТЕМНОПОЛЬНАЯ МИКРОСКОПИЯ (греч. mikros малый + skopeo смотреть, исследовать) — метод микроскопического исследования объектов, не поглощающих света и отличающихся по оптическим свойствам от окружающей среды.

Лептоспира в темном поле (снято с экрана электроннооптического усилителя яркости).

Лептоспира в темном поле (снято с экрана электроннооптического усилителя яркости).

Читайте также:  Как лечится кишечная палочка у беременных

Области применения Темнопольной микроскопии как с диагностической целью, так и в исследовательской работе — это в основном прижизненное изучение спирохет, трепонем, лептоспир, жгутикового аппарата бактерий и даже отдельных жгутиков, обнаружение крупных вирусов. Так, Темнопольную микроскопию применяют для диагностики возвратного тифа по «феномену нагрузки» (реакция Брусина — Риккенберга), лептоспироза по морфологии лептоспир и реакции агглютинации и лизиса, сифилиса по морфологии трепонем и т. д. В изучении физиологии клетки Т. м. может быть использована для наблюдения за влиянием различных физ.-хим. факторов на структуру цитоплазмы. На рисунке показан внешний вид лептоспиры при Т. м.

Принцип Т. м. заключается в том, что объект освещается косыми лучами или боковым пучком света. При этом в объектив микроскопа попадают только лучи, рассеянные объектами, находящимися в поле зрения. Поэтому наблюдатель видит их ярко светящимися на темном фоне. Т. м. позволяет обнаруживать значительно более мелкие микрообъекты, чем микроскопия в светлом поле. При Т. м. невозможно определить точную форму мелких деталей объекта, поскольку темнопольное изображение представляет собой светящийся ореол вокруг объекта.

Впервые Т. м. осуществили в 1902 г. Р. Жигмонди и Зидентопф (F. W. Ziedentopf) с помощью щелевого ультрамикроскопа; объект при этом освещался боковым пучком света, перпендикулярным оптической оси микроскопа. В таком приборе мельчайшие частицы, величина к-рых лежит за пределами разрешающей способности светового микроскопа, становились видимыми благодаря эффекту Тиндаля (аналогично пылинкам, освещенным узким пучком света). Этот метод освещения не нашел применения для изучения биол. объектов, но используется в ультрамикроскопе (см.), предназначенном для исследования коллоидных систем.

В дальнейшем были разработаны различные способы получения эффекта темного поля. В биологической Т. м. применяется преимущественно метод центрального затемнения в конденсоре. Оно может быть достигнуто простым способом — затемнением центральной части обычного светлопольного конденсора путем помещения кружка черной бумаги на его нижнюю линзу или на стекло под конденсором в держателе для фильтров либо с помощью центральной диафрагмы из плотных материалов — картона, металла. Диаметр центрального затемненного участка должен быть таким, чтобы его изображение полностью перекрывало выходной зрачок используемого объектива. Для каждого объектива он подбирается опытным путем.

Более высокое качество изображения может быть достигнуто при применении специальных линзовых и зеркальных параболоид- и кардиоид- конденсоров, особенно кардиоид-конденсора в сочетании с высокоапертурными (до 0,85) иммерсионными объективами. Для получения темнопольного освещения в падающем свете используют эпиконденсоры с кольцевидным зеркалом.

Отечественная промышленность выпускает специальные конденсоры для Т. м.: низкоапертурный (А—0,7) конденсор светлого и темного поля с большим рабочим расстоянием (ОИ-Ю) для работы с объективами малого увеличения и высокоапертурный (А—1,2) конденсор темного поля (ОИ-13) для работы с любыми объективами (с апертурой не выше 0,85).

При Т. м. апертура объектива должна быть ниже, чем апертура конденсора, для того чтобы крайние лучи не могли попасть из конденсора непосредственно в объектив. Для уменьшения апертуры иммерсионных объективов применяют диафрагмы различных типов: либо в виде воронок-вкладышей, либо ирисовые, позволяющие плавно изменять апертуру от 1 —1,25 до 0,7—0,85. Объективы с переменной апертурой, снабженные ирисовой диафрагмой, могут быть использованы как для светлопольной микроскопии, так и для темнопольной. Для увеличения апертуры конденсора н улучшения качества изображения нужно иммергировать конденсор, помещая каплю иммерсионной жидкости между фронтальной линзой конденсора и нижней поверхностью предметного стекла.

Предметные и покровные стекла для Т. м. должны быть абсолютно чистыми, без царапин, поскольку все эти дефекты выявляются при Т. м. и препятствуют наблюдению объектов. Толщина предметных стекол должна быть не более 1,1 мм, покровных — 0,17 мм. При использовании более толстых предметных стекол лучи, выходящие из конденсора, невозможно сфокусировать на препарате, т. к. их пересечение окажется в толще стекла, а в микроскопе будет видно не темное поле с ярко светящимися объектами, а темный круг со светящейся периферией — оптический срез конуса расходящихся лучей. Такая же картина может наблюдаться при использовании слишком тонких предметных стекол (пересечение лучей находится выше плоскости препарата); в этом случае положение может быть исправлено опусканием конденсора.

Для получения хорошего темнопольного изображения необходимо использовать осветители с источниками света, имеющими большую поверхностную яркость и работающими в режиме максимального накала, а также проводить центрировку света, о к-рой можно судить по свечению пузырьков воздуха в препарате (при децентрированном освещении они светятся неравномерно — в виде серпа, а при центрированном — имеют равномерно светящийся ободок).

Темнопольное освещение в микроскопе осуществляется следующим образом: после установки света в светлом поле по Келеру (см. Микроскопические методы исследования) заменяют конденсор на темнопольный. На фронтальную линзу конденсора наносят каплю иммерсионной жидкости (воды, иммерсионного .масла) и поднимают конденсор до соприкосновения с нижней поверхностью предметного стекла с препаратом, находящегося на столике микроскопа. Наблюдая в окуляр, фокусируют на препарат объектив с небольшим увеличением. Вертикальным перемещением конденсора добиваются минимального размера светового пятна. С помощью центрировочного приспособления конденсора выводят световое пятно в центр поля зрения, устанавливают объектив нужного увеличения и дополнительно центрируют конденсор.

Препарат готовят по методу раздавленной капли (см.); толщина слоя жидкости в препарате между предметным и покровным стеклами должна быть минимальной.

Темнопольная микрофотосъемка и киносъемка движущихся объектов (лептоспир, жгутиков) представляет значительные трудности из-за недостаточной яркости изображения. Их преодоление возможно с помощью электронно-оптических и телевизионных усилителей яркости изображения (см. Люминесцентная микроскопия).

В электронной микроскопии также был получен эффект темного поля. Однако этот метод не нашел применения для изучения биол. объектов.

См. также Микроскоп.

Библиография: Аппельт Г. Введение в методы микроскопического исследования, пер. с нем., с. 116, М., 1959;

Роскин Г. И. и Левинсон Л. Б. Микроскопическая техника, с. 37, М., 1957;

Руководство по микробиологической диагностике инфекционных болезней, под ред. К. И. Матвеева, М., 1973; Скворцов Г. Е. и др. Микроскопы, с. 83, Л., 1969; Ноtani Н. Light microscope study of mixed helices in reconstituted Salmonella flagella, J. molec. Biol., v. 106, p. 151, 1976.

Источник